脳損傷後の神経回路網再建を目指した神経再生療法の開発

开发旨在重建脑损伤后神经网络的神经再生疗法

• 批准号: 15H04951
• 负责人: 川原 信隆
• 金额: $ 8.82万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15H04951/
• 关键词: Lotus; 神経再生; 軸索再生; 脳損傷; 脳梗塞

1) 平成27年度は、前期の研究の継続として、遺伝子改変マウス脳梗塞モデルでの、行動解析と神経軸索再生の検討を行った。その結果、Lotus過剰発現マウスではBederson testにて有意な運動能力の改善が得られ、脳幹部と頚髄にて対側(非損傷側から)の有意な神経軸索の再生が見られた。これらは、発現しているLotusの量と相関しており、過剰発現Lotusによる脳梗塞後の機能回復が可能となったと考えられ、現在論文を投稿するところである。2) 胎児からの成体脳での歯状回での遊走障害に関しては、残念ならが最終的に傾向はあったものの有意な差がえられなかった。そのため、次年度予定を繰り上げて研究を進めることとした。3) 実験系をラットに移行するためにRat Lotusを過剰発現するTgラットを作成した。また、ラットLotusを検出するより良好な抗体を作成した。RT-PCRにて導入遺伝子と蛋白発現との関連は良好であることを確認した。損傷モデルとしては、脳梁離断モデルと、皮質運動野損傷モデルを検討した。i)脳梁離断モデル : 脳固定装置を用いてstereotaxicに脳梁を切断するモデルを作成した。DAを注入すると脳梁離断面を超えて右側の脳梁に染色された神経軸索が確認された。今後遺伝子発現や電気生理学的に検討を追加する。ii)皮質運動野損傷モデル : 硬膜外から刺激可能なgrid電極を作成し、後肢領域を刺激することで下肢骨格筋から誘発反応を記録することに成功し、電気生理学的検索の準備はほぼ完了した。脊髄より逆行性トレーサー(FG)を注入し上肢運動野の錐体細胞が染まることを確認した。今後は腰髄注入も検討する予定である。これらの検証後に、運動野の損傷モデルを作成する予定である。

1)In 2007, we conducted research on early and late development, genetic modification, behavioral analysis and neuroaxonal regeneration. The results showed that the Bederson test resulted in an improvement in motor capacity and an increase in the number of neurons on the opposite side (non-injured side). The Lotus Volume is related to the Lotus Volume. The Lotus Volume is related to the Lotus Volume. 2)The child's adult body has a tendency to drift away from it, and the child's body has a tendency to drift away from it. The next year, I'm going to study it. 3)The Rat Lotus was created as a result of the migration process. A good antibody is produced. RT-PCR was used to confirm the relationship between gene expression and protein production. The damage is caused by the injury, the beam is disconnected, and the cortical motor field is damaged. i) The beam is disconnected: the fixing device is used in the stereotaxic beam disconnection. The right side of the beam is stained. Future research on gene discovery and electrophysiology will be added. ii) Cortical motor field injury: Epidural stimulation possible grid electrode preparation, hindlimb stimulation possible, lower limb bone muscle induction response recording successful, electrophysiological preparation complete. The pyramidal cells of the upper limb movement field were injected into the spinal cord and confirmed. In the future, we will continue to discuss the issue. After the test, the movement field damage is determined.

项目成果

Overexpressed LOTUS improves functional recovery after brain focal ischemia in mice

过度表达的 LOTUS 可改善小鼠脑局灶性缺血后的功能恢复

• 发表时间: 2015
• 作者: Takase H;Yokoyama T;Kurihara Y;Takei K;Kawahara N
• 通讯作者: Kawahara N