細胞膜流動性亢進によるエンドサイトーシスを介したウイルス感染促進メカニズムの解明

阐明细胞膜流动性增加通过内吞作用促进病毒感染的机制

基本信息

批准号：
15J09038
负责人：
松田幸樹
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J09038/
关键词：
HIV-1 AIDS ウイルス侵入膜流動性 gp120

项目摘要

本研究の目的は、HIV-1侵入過程における、細胞膜流動性とエンドサイトーシスの関係に着目し、シグナル伝達メカニズムの解明と予防法の開発に供することである。宿主細胞とHIV-1の膜融合は、HIV-1侵入において最も重要な過程のひとつであるが、この過程を標的とした薬剤は未だ少なく、さらなるウイルス侵入阻害薬の開発が期待されている。ウイルス侵入過程を制御することができれば、その後のウイルス複製に至るまでのイベントを止めることが可能である。平成27年度は、以下研究を遂行した。1.ウイルスの宿主細胞への吸着が及ぼすシグナル伝達経路の解明及び脂質ラフト形成への影響の検討 : HIV-1がPI3K/AKT経路を活性化することをWestern Blottingにて確認した。HIV-1感染はウイルスの濃度依存的、感染の時間依存的にリン酸化AKTを活性化させることが判明した。また、組み換えgp120 (HIV-1 envelope protein) を同細胞に処理し、リン酸化AKTの発現を確認したところ、生ウイルスを感染させた時と同様にリン酸化AKTが活性化されることが判明した。また、細胞膜流動性を亢進させることで脂質ラフトの凝集（クラスター形成）が確認され、PI3K/AKT経路阻害剤処理によりクラスター形成は抑制された。従ってHIV-1 の細胞への吸着または侵入過程でPI3k/AKT経路が活性化していることが示唆された。2. HIV-1侵入過程におけるPI3K/AKTシグナルの重要性の検討 : PI3K阻害剤によりシグナルを抑制することでHIV-1感染は有意に抑制された。また、HIV-1エンベロープタンパク (Env) 依存性細胞融合もPI3K阻害剤を処理することで有意に抑制された。

这项研究的目的是关注HIV-1入侵过程中细胞膜流动性和内吞作用之间的关系，并阐明信号传导和发展预防方法的机制。宿主细胞和HIV-1的膜融合是HIV-1进入中最重要的过程之一，但仍很少有针对此过程的药物，并且预计病毒侵袭抑制剂的进一步发展。如果可以控制病毒入侵过程，则可以停止随后导致病毒复制的事件。 2015年，进行了以下研究。 1。阐明由病毒吸附到宿主细胞引起的信号转导途径以及对脂质筏形成的影响的研究：蛋白质印迹证实，HIV-1激活了PI3K/AKT途径。发现HIV-1感染以病毒浓度依赖性和时间依赖性方式激活磷酸化的Akt。此外，当细胞用重组GP120（HIV-1包膜蛋白）处理并确认磷酸化Akt的表达时，发现磷酸化的Akt的激活方式与被活病毒感染时相同的方式激活。此外，通过增强细胞膜流动性，确认了脂质筏的聚集（簇形成），并通过PI3K/AKT途径抑制剂处理抑制簇形成。因此，建议在HIV-1对细胞的吸附或进入过程中激活PI3K/AKT途径。 2。在HIV-1侵袭过程中PI3K/AKT信号的重要性检查：HIV-1感染通过抑制PI3K抑制剂来显着抑制HIV-1感染。 HIV-1包膜蛋白（ENV）依赖性细胞融合也通过PI3K抑制剂处理显着抑制。