概日時計遺伝子によるアレルギー性疾患の病態制御機構の解明

生物钟基因阐明过敏性疾病的病理控制机制

• 批准号: 15K07940
• 负责人: 柏田 正樹
• 金额: $ 3.16万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15K07940/
• 关键词: 時計遺伝子; 概日リズム; 樹状細胞; アレルギー性疾患

アレルギー疾患はその発症や症状の憎悪に時間特異性があることが経験的に知られているが、なぜこのような概日リズムがあるのかは不明である。これまで時計遺伝子の一つNFIL3のノックアウト（KO）マウスを用いた解析から、時計遺伝子NFIL3がTh2やTh17タイプの炎症反応の制御に関わっていることを明らかにしてきた。本研究では、アレルギー性疾患、特に炎症性皮膚炎に注目し、時計遺伝子NFIL3がその病態制御にどのように関わっているのかを明らかにすることを目的としている。アレルギーの発症には、抗原による感作と、感作後の炎症誘導の過程が必須であり、樹状細胞と呼ばれる抗原提示細胞が中心的役割を担っている。NFIL3 KOマウスでは、脾臓やリンパ節の常在性樹状細胞CD8a+樹状細胞が欠損していることから、CD8a+樹状細胞と発生系統的に近いCD103+樹状細胞の分化もNFIL3によって制御されている可能性がある。そこでNFIL3 KOマウスにおいて皮膚所属リンパ節に多く存在するCD103+樹状細胞の存在状態を調べると、CD103+樹状細胞は欠損していた。in vitroでCD103樹状細胞の分化を分子レベルで解析するために、骨髄細胞をサイトカインFlt3LとGM-CSFの存在下でその分化誘導法を用いた。分化効率は既報に比べ低かったが、レンチウイルスを用いた再構成系を用いるため、感染マーカーとしてのGFPを指標として、解析を行うことができた。またin vivoで効率よくCD103＋樹状細胞を誘導するためにメラノーマ細胞株B16にFlt3LやGM-CSFを過剰発現させ、それらの皮下投与によりリンパ節においてCD103＋樹状細胞の強力な誘導を確認できた。これらin vitroやin vivoの系を用いて、様々なNFIL3変異体発現CD103樹状細胞の分化能や抗原提示能を解析した。

The symptoms of disease are time-specificに知られているが、なぜこのような凯日リズムがあるのかは无码である. Timepiece Legacy Sub-NFIL3がTh2やTh17タイプのinflammatory reactionのcontrolに关わっていることを明らかにしてきた. This study focuses on sexual diseases, special inflammatory dermatitis, and timekeeping legacy NFIL3がそのmorbid controlにどのように关わっているのかを明らかにすることをpurposeとしている.アレルギーの発には, antigen によるsensitivity と, inflammatory induction process after sensitization がであり, dendritic cells とcall ばれるantigen prompting cells がを倣ている in the center. NFIL3 KOマウスでは, spleen やリンパの resident dendritic cell CD8a+ dendritic cell loss していることから, CD8a+ The possibility of differentiation of CD103+ dendritic cells in the dendritic cell development system is controlled by NFIL3.そこでNFIL3 KO マウスにおいて skin belongs to リンパ节に多くexisting するCD103+ dendritic cell のexisting status をadjusted べると, CD103+ dendritic cells はdeficiency していた. In vitro differentiation of CD103 dendritic cells was performed using a molecular analysis method, bone marrow cell differentiation induction method in the presence of GM-CSF was used. The differentiation efficiency is lower than that of the original one.ため, infection マーカーとしてのGFPを indicator として, analysis を行 うことができた.またin Vivo efficiency: CD103+ dendritic cells induction: するためにメラノーマcell line B16にFlt3LやGM-CS The strong induction of CD103+ dendritic cells has been confirmed by subcutaneous administration of the Fをpassing the disease. This system has demonstrated the differentiation ability of CD103 dendritic cells and the ability of antigen presentation and analysis using the NFIL3 allogeneic system in vitro and in vivo.