超音波内視鏡下穿刺吸引細胞診による膵腫瘍と膵嚢胞におけるエクソソームの解析

使用内窥镜超声引导细针抽吸细胞学分析胰腺肿瘤和囊肿中的外泌体

• 批准号: 16K09412
• 负责人: 西村 誠
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Geriatric Hospital and Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16K09412/
• 关键词: エクソソーム; 膵嚢胞; miRNAマイクロアレイ解析; IPMN; 膵腫瘍; 膵癌; プロテオーム

本研究は膵腫瘍または膵嚢胞性腫瘍の疑いでEUS-FNA（超音波内視鏡下穿刺術）を実施する症例の血液または嚢胞液から単離したエクソソームのプロテオーム・マイクロアレイ解析等を行い、エクソソームで発現変化を示すタンパク質・核酸を同定した後に、多数の患者検体を用いてその疾患特異性を確認する。さらに、ヒト膵臓癌細胞を用いた実験により、エクソソームで発現変化を示したタンパク質・核酸が細胞内で増殖・浸潤・転移能等に及ぼす影響を明らかにし、患者の血液・嚢胞液を用いた膵腫瘍・膵嚢胞性腫瘍のエクソソーム診断を目指すことを目的とした。最終年度は患者血清由来エクソソーム中のmiRNA解析を行った。IPMNおよび膵臓癌ステージIIA, IVの患者血清をステージ毎に数例プールし、エクソソーム膜表面のフォスファチジルセリンに対するアフィニティーを利用した精製方法によりエクソソームを単離した。単離したエクソソームよりRNAを抽出し、3D-Gene（TORAY）にてmiRNAマイクロアレイ解析を行ったところ、IPMNと比較して発現量が2倍以上増加したものがステージIIAで25個、ステージIVで24個、また2分の1以下に減少したものがステージIIAで16個、ステージIVで22個あった。これらのうち比較的発現量が多いものを候補miRNAとして選定し、今後の解析を進めることとした。上記内容も含めて期間全体を通じて実施した研究の成果をまとめると、①検体採取と保存を合計22症例で行った。②不死化正常膵管上皮細胞と膵臓癌細胞由来のエクソソームの定量プロテオーム解析を行い、膵臓癌細胞で発現が増加したタンパク質のうち膜表面タンパク質を候補として選定した。③患者血清中エクソソームの単離とmiRNAマイクロアレイ解析を行い、膵臓癌の候補miRNAを選定した。今後、これらタンパク質およびmiRNAの詳細な解析を行うことで、膵臓癌におけるエクソソームの役割の解明や診断システムの開発につながるものと期待される。

This study は Cui swollen sores ま た は Cui 嚢 cell sex is swollen sores の suspected い で EUS FNA - (puncture) under ultrasound endoscopy を be applied す ま る disease cases の blood た は 嚢 cytosol か ら 単 from し た エ ク ソ ソ ー ム の プ ロ テ オ ー ム · マ イ ク ロ ア レ resolution of イ を い, エ ク ソ ソ ー ム で 発 now - the を shown す タ ン パ ク with fixed mass, the nucleic acid を し た に, after much The 検 bodies of several patients を were confirmed する by を てそ <s:1> disease-specific を. さ ら に, ヒ ト Cui viscera cancer を with い た be 験 に よ り, エ ク ソ ソ ー ム で 発 now - the を shown し た タ ン パ ク qualitative, nucleic acid が で raised colonization in cells, infiltration, planning to move to に and ぼ す influence を Ming ら か に し, patient · 嚢 の blood cell liquid を with い た Cui swollen sores, Cui 嚢 cell sex is swollen sores の エ ク ソ ソ ー ム diagnosis を refers す こ と を purpose と し た. The source of the serum of the final year エ patients エ ソソ ム ム ム miRNA analysis を row った. IPMN お よ び Cui viscera cancer ス テ ー ジ type IIA, IV の patients serum を ス テ ー ジ in their several プ に ー ル し, エ ク ソ ソ ー ム membrane surface の フ ォ ス フ ァ チ ジ ル セ リ ン に す seaborne る ア フ ィ ニ テ ィ ー を using し た refined methods に よ り エ ク ソ ソ ー ム を 単 from し た. 単 from し た エ ク ソ ソ ー ム よ を り RNA extraction し, 3 d - Gene (TORAY) に て micrornas マ イ ク ロ ア レ イ parsing line を っ た と こ ろ, IPMN と compare し て 発 now quantity が 2 times more raised し た も の が ス テ ー ジ type IIA で 25, ス テ ー ジ IV で 24, ま た below 2 points の 1 に reduce し た も の Youdaoplaceholder0 がステ ジ ジIIAで16, ステ ジ ジIVで22 あった. こ れ ら の う ち compare more 発 now quantity が い も の を alternate micrornas と し て し, selected the future の parsing を into め る こ と と し た. Written content contains も め て during all the を tong じ て be applied し の た research を ま と め る と, (1) take と 検 body save を total 22 cases line で っ た. (2) the undead is changed to normal Cui tube epithelial cell と Cui viscera cancer cell origin の エ ク ソ ソ ー ム の quantitative プ ロ テ オ ー ム parsing を い, Cui viscera cancer で 発 now が raised し た タ ン パ ク qualitative の う ち membrane surface タ ン パ ク qualitative を alternate と し て selected し た. (3) in patients with serum エ ク ソ ソ ー ム の 単 from と micrornas マ イ ク ロ ア レ イ parsing を い, Cui viscera cancer の alternate micrornas を selected し た. In the future, こ れ ら タ ン パ ク qualitative お よ び micrornas の detailed analytical line を う な こ と で, Cui viscera cancer に お け る エ ク ソ ソ ー ム cut の の service interpret や diagnosis シ ス テ ム の open 発 に つ な が る も の と expect さ れ る.

项目成果

尿路感染の診断におけるエクソソームの有用性について

外泌体在诊断尿路感染中的用途

• 发表时间: 2017
• 作者: 水谷晃輔;川上恭司郎;藤田泰典;堀江憲吾;亀山紘司;伊藤雅史;出口隆
• 通讯作者: 出口隆

Induction of Akt in urinary exosome by bacterial infection.

细菌感染诱导尿液外泌体中的 Akt。

• 发表时间: 2017
• 作者: Mizutani K;Horie K;Shirahama T;Akiyama N;Kawakami K;Fujita Y;Kameyama K;Ito M;Deguchi T.
• 通讯作者: Deguchi T.

尿路性器癌研究の最前線: Identification of novel biomarkers and therapeutic targets for urological cancer

泌尿系癌症研究前沿：泌尿系癌症新型生物标志物和治疗靶点的鉴定

• 发表时间: 2017
• 作者: 松尾淳司;大久保寅彦;中村眞二;山口博之;伊藤雅史
• 通讯作者: 伊藤雅史

前立腺癌の診断におけるエクソソーム上γ-グルタミルトランスフェラーゼ活性の有用性

外泌体γ-谷氨酰转移酶活性在前列腺癌诊断中的应用

• 发表时间: 2017
• 作者: 川上 恭司郎;藤田 泰典;伊藤 雅史
• 通讯作者: 伊藤 雅史

抗PSMA抗体ビーズより採取した前立腺癌関連エクソソームのプロテオーム解析

从抗 PSMA 抗体珠中收集的前列腺癌相关外泌体的蛋白质组分析

• 发表时间: 2017
• 作者: 水谷晃輔;川上恭司郎 ;藤田泰典;堀江憲吾;亀山紘司;伊藤雅史;出口隆
• 通讯作者: 出口隆