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短期的電気刺激による無細胞化神経への端側神経縫合を用いたシュワン細胞付加の可能性

使用端到端神经缝合线通过短期电刺激将雪旺细胞添加到无细胞神经的可能性

基本信息

批准号：
17K11550
负责人：
吉澤秀和
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-01 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は幼弱化シュワン細胞が蛍光発色するnestin-GFP mouse を保有し用いることで、Donor 神経に少なくとも軽微な損傷を加えることで多くのシュワン細胞の遊走が無細胞化神経内に観察され、特に移植神経の両側端をDonor 神経へ端側神経縫合を行なった群でさらに豊富なシュワン細胞が短期間に遊走し移植神経全域へ充填することに成功し2016年に報告した。当施設の遺伝子組み換え動物の研究施設の改修工事が行われることとなり、上記モデルが作成困難な状況となった。そのため、一度繁殖していたマウスを凍結受精卵の状態にする必要に迫られた。また、時期を同じく他施設へ出向となったため、凍結受精卵を孵化させ出向先にて遺伝子改変マウスを飼育する手続きが完了し、元の施設で孵化させ出向先に搬入し研究を開始した。GFP-positiveのmouseの繁殖に時間を要したが、直径１mmのリナーブをDonor神経に端側縫合するモデル作成を開始した。長さを10mm程度として端側縫合モデルの作成を行ったが、リナーブの柔軟性が乏しく両側端を端側縫合することは困難であった。また、繁殖されたGFP-posivite mouseの大腿神経の大きさも細いものが多く、柔軟性の乏しいリナーブとの神経縫合が困難であった。片端を端側神経縫合したモデルを前実験モデルとして数匹作成し、Live imagingでの蛍光発色を確認したが、発色が確認できなかった。さらに、出向先の遺伝子組み換え動物の研究施設の改修工事が決定し、マウスの飼育の継続が困難となった。遺伝子組み換え動物をLive imaging技術を用いて経時的に観察し、シュワン細胞の遊走を観察しているため、相次いでモデル作成の継続困難な状況のため、モデル作成の段階で継続ができない状況が続いた。

The nestin-GFP mouse remains active in cells that are weakened by the presence of light, and in cells that are free from cellular damage. In particular, the transplantation of nerve end-to-end neuro suture group, rich in cells, short-term migration, transplantation of nerve end-to-end neuro suture group, successful in 2016 When the construction of the genetic sub-group is changed, the modification works of the animal research facilities are carried out, and the difficulties are recorded. It is necessary to freeze the state of the fertilized egg when it reproduces. In the same period, the fertilized eggs were frozen and incubated. In the same period, the fertilized eggs were incubated and incubated. In the same period, the fertilized eggs were incubated and incubated. In the fertilized eggs were incubated and incubated. In the same period, the fertilized eggs were incubated and incubated. In the fertilized eggs were The reproduction time of GFP-positive mouse is important, and the diameter of mouse is 1 mm. The length is 10mm and the end seam is difficult to make. It is difficult to suture the thigh nerve of the GFP-posivite mouse. The end of the film is stitched together and the color of the film is confirmed. In the past, the research facilities of animal replacement have been modified to determine the difficulties of breeding. The sub-group changes the animal's Live imaging technology to use in the middle of the day, the cell's movement to detect, the phase to create the difficult situation, the phase to create the difficult situation