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チャネルロドプシン発現神経節細胞の形態学的分類による視機能シミュレーション

基于表达通道视紫红质的神经节细胞形态分类的视功能模拟

基本信息

批准号：
22591962
负责人：
渡部眞三
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010-04-01 至 2013-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

緑藻類クラミドモナスが持つ光受容タンパク質「チャネルロドプシンー2(ChR2)」は、光受容能と陽イオン選択的チャネルとしての機能を有し、神経細胞に遺伝子導入することによって、光受容能を賦与することができる。この特徴的な機能を利用することで、遺伝盲ラットの視機能を獲得することに成功している。この方法では、視細胞が消失した網膜の神経節細胞(RGC)にChR2を導入することによって、RGCに光受容能を与える。RGCには、役割の異なる数タイプが存在することから、アデノ随伴ウイルスベクター(AAV)を用いた遺伝子導入によって、ChR2が発現されたRGCのタイプを調べることは、回復される視機能をシミュレートするのに有用である。ラット網膜への遺伝子導入では、投与するウイルスベクターの濃度に依存して、導入される細胞が異なることが示されている。濃度の減少に伴って小サイズの神経節細胞には導入されず、大型の神経節細胞に限定されることが明らかとなった。今回、カニクイザルを用いて、アデノ随伴ウイルスベクターによる網膜神経節細胞への導入効率を調べた。アデノ随伴ウイルスベクターを硝子体内に投与し、遺伝子の発現を網膜進展標本を作製し調べたところ、遺伝子発現は確認されなかった。その原因が硝子体にあると考え、硝子体を酵素的に融解し、遺伝子導入を行うことを試みた。硝子体を融解後、アデノ随伴ウイルスベクターを投与したところ、網膜神経節細胞での遺伝子の発現を確認することができた。ラットでの研究と同様に、大型の神経節細胞に発現が見られた。しかし、遺伝子導入効率は、ラット網膜への遺伝子導入と異なり、遥かに低いものであった。

Green algae have the function of photoreceptivity, photoreceptivity, and photoreceptivity 2(ChR2), and the function of photoreceptivity, photoreceptivity, and photoreceptivity. The function of this feature is utilized, and the visual function is acquired successfully. The method includes the following steps: introducing ChR2 into retinal ganglion cells (RGC) without visual cells; and introducing ChR2 into retinal ganglion cells (RGC) without visual cells. The number of different RGC segments exists, and the number of ChR2 segments appears. ChR2 is generated and used to generate the RGC segment. The expression of the gene in the retina depends on the concentration of the gene. The decrease in concentration is accompanied by the introduction of small and large ganglion cells. In the present study, the introduction rate of retinal ganglion cells was adjusted according to the application of the drug. In addition, the development of the gene in vivo is controlled by the gene expression system. The reason for this is that nitrate-related enzymes are melted and introduced into the body. After the nitrate is melted, it is necessary to confirm the occurrence of the nitrate in the retinal ganglion cells. The same research and development of large-scale neuronal cells have been observed. The introduction rate of the gene is different from that of the gene in the retina.