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間歇型一酸化炭素中毒モデルの作成と解析研究

间歇性一氧化碳中毒模型的建立及分析研究

基本信息

批准号：
23591710
负责人：
福原竜治
金额：
$ 3.24万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2012
项目状态：
已结题

项目摘要

〈平成23年度〉間歇型一酸化炭素(CO)中毒モデルラット作成を行った。まず、CO暴露前日に、受動回避試験を行い、暗室で電気刺激し、明室に300秒以上待機することを確認する。CO濃度1000ppmで40分、3000ppmで20分で暴露し、ラットが意識消失させたが、翌日にも明室で300秒待機していた。その後、暴露後3日後、1週間、2週間、3週間後の明室での待機時間(秒)を計測し、同時に動物用MRI撮影装置を用い変化を調べた。対照として、CO非暴露群を作成し比較した。その結果、3週間後の受動回避試験による明室での滞在時間がCO非暴露群では試験開始日と比べ有意な差を示さなかったのに対して、CO暴露群では、有意に低下し、CO暴露により、遅発性の認知機能の低下が起こったことを確認した。脳MRIでは、変化は確認できなかった。<平成24年度>CO暴露群とCO非暴露群、それぞれを3週間後に断頭し、脳組織(嗅脳、前頭葉、側頭葉、線条体、視床、海馬、中脳、橋、小脳)を摘出し、mRNAおよびタンパク質の解析のために保存する。RNA分画を抽出後、一部は、DNAチップによる遺伝子発現の網羅的解析を行った。その結果、いくつかの遺伝子については、有意な遺伝子発現量の増加ないし低下を確認することができた。現在、それらの遺伝子についてリアルタイムPCRによる追試験及びウエスタンブロッティングによるタンパク質発現を解析中である。これにより一酸化炭素暴露による脳内の分子生物学的影響が解明されれば、遅発性脳症の予防もしくは治療の手がかりになると考えられる。

"Heisei 23" intermittent type of carbon (CO) poisoning The day before CO exposure, the day before the test, the day after dark, the day before the test, the day before dark, the day after dark, the day before dark, the day, the day, the day before dark, the day, the day, the day. CO concentration: 1000ppm: 40 minutes; 3000ppm: 20 minutes; exposure: 1000 ppm; consciousness: 300 seconds; light: 300 seconds; standby: 3000 ppm. The waiting time (seconds) in the bright room was measured after exposure, 3 days after exposure, 1 week, 2 weeks, and 3 weeks after exposure, and the animal MRI imaging device was adjusted. For comparison, CO exposure was determined. The results showed that after 3 weeks, the latency of the test was significantly lower than that of the CO exposure group, and the onset of cognitive impairment was confirmed. MRI CO-exposed group and CO-unexposed group were extracted and mRNA and protein were analyzed and preserved within 3 weeks after decapitation and tissue (olfactory lobe, anterior parietal lobe, lateral parietal lobe, linear body, optic bed, hippocampus, middle lobe, bridge, and small lobe). After RNA extraction, part of the DNA sequence was analyzed. The result is that there is no evidence of an increase in the amount of intentional transmission and no evidence of an increase in the amount of intentional transmission. Now, we are trying to analyze the quality of PCR products. The molecular biological effects of carbon exposure on the development and prevention of chronic diseases have been investigated.