γδT細胞を使用した、神経芽腫幹細胞に対する免疫療法の基盤研究

γδT细胞神经母细胞瘤干细胞免疫治疗的基础研究

• 批准号: 23791214
• 负责人: 西尾 信博
• 金额: $ 2.16万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23791214/
• 关键词: γδT細胞; 神経芽腫; 癌幹細胞; ゾレドロネート

3人の健常人末梢血単核球から、ゾレドロネートとIL-2を用いてγδT細胞を増幅した。その後磁気ビーズを用いてγδT細胞を純化し、以後の実験に使用した。クロミウム放出試験による細胞傷害性試験で、γδT細胞はゾレドロネートで処理した神経芽腫細胞株を傷害した。神経芽腫細胞株をEGF、FGF添加無血清培地で培養し、神経芽腫sphereを樹立した。この神経芽腫sphereは元の付着細胞と比較し、in-vitroで高いコロニー形成能を示し、また免疫不全マウス(SCIDマウス)への移植実験でも高い腫瘍形成能を呈した。これらの結果から神経芽腫sphereには神経芽腫幹細胞が濃縮されていると考えられた。γδT細胞は、ゾレドロネートで処理した神経芽腫sphereにも傷害性を示した。γδT細胞の傷害性が神経芽腫sphereの中にある神経芽腫幹細胞に対してあるのかどうかを確かめるために、まずin-vitroでのコロニーアッセイを行ったところ、γδT細胞の存在下では神経芽腫コロニー形成能が阻害された。また、SCIDマウス腎被膜下に神経芽腫sphereとγδT細胞を移植したところ、腫瘍形成が阻害された。これらの結果からγδT細胞は神経芽腫幹細胞に傷害性があることが示唆された。また、これらの傷害性は、抗γδT細胞受容体抗体とHMGCoA阻害剤であるメバスタチンにより阻害されたが、抗NKG2D抗体では阻害されなかった。この結果から、γδT細胞の傷害性はγδTCR受容体を介しており、NKG2Dを介したNK活性によるものではないことが示された。

3 healthy human peripheral blood mononuclear cells, IL-2 and IL-2 expression increased. The use of gamma delta T cells in the purification and subsequent use of the virus The cell injury test was performed by the gamma delta T cells in response to the treatment of neuroblastoma cells. Neuroblastoma cell lines were cultured in serum-free medium supplemented with EGF and FGF, and neuroblastoma spheres were established. The neuroblastoma sphere is a cell that has a high level of tumor formation, which can be demonstrated by comparison, in vitro, and transplantation. The results of this study are as follows: Neuroblastoma sphere, Neuroblastoma stem cell concentration Gamma delta T cells are responsible for the development of neuroblast-like cells and for the expression of nociception. In the presence of gamma delta T cells, the formation of neuroblastoma can be inhibited by the presence of gamma delta T cells. SCID cells are transplanted into the renal capsule to prevent tumor formation. The result is that gamma delta T cells are injurious to nerve cells. Anti-gamma delta T cell receptor antibody and anti-NKG 2D antibody are the most effective inhibitors of HMG CoA. The results showed that γδT cells were injurious to γδTCR receptor and NK activity mediated by NKG2D.