エリオシトリンによるメタボリックシンドローム改善作用の網羅的メカニズム解析

圣草次苷改善代谢综合征作用的综合机制分析

• 批准号: 24590318
• 负责人: 島田 康人
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24590318/
• 关键词: 肥満; 脂質異常症; ゼブラフィッシュ; DNAマイクロアレイ; バイオインフォマティクス; 薬理; ゲノム

これまで我々は食餌性肥満モデルゼブラフィッシュの構築に成功し（Oka et al. BMC Physiology, 2010）、それを用いたin vivoスクリーニングを行い、その成果を報告してきた(Tainaka et al, Lipid & Metabolism, 2011)。今回の研究提案は、抗肥満作用を示した化合物群のうち、まだその作用機序が不明であるエリオシトリン（eriocitrin）に注目し、その作用メカニズムを食餌性肥満ゼブラフィッシュ（in vivo）とヒト培養細胞（in vitro）の両面から網羅的に解明することを目的とした。具体的には、初年度はスクリーニング実験結果の再現性を確認した後、ゼブラフィッシュ由来脂肪組織における網羅的遺伝子発現解析からメカニズムを推定し、次年度はゼブラフィッシュとヒト培養細胞系（肝臓・脂肪前駆細胞）の両面からそのメカニズムのバリデーションを行う予定である。今年度は、食餌性肥満モデルへの２回の投与実験を行い、１回目実験での再現性確認を行った。エリオシトリンを経口投与した群では、体重増加への影響はなかったものの、血中脂質パラメーターが劇的に改善しており、肝臓脂肪蓄積が抑制されていた。２回目実験では上記発現解析用脂肪組織（内臓脂肪および肝臓）の網羅的遺伝子発現解析（DNAマイクロアレイ）を行った。Subnetwork enrichment analysisを用いたパスウェイ解析からそのメカニズムを推定した。さらにゼブラフィッシュから予想されたエリオシトリンの脂質異常症に対する治療メカニズムについて、ヒト培養細胞系を用いてバリデーション実験を行い、in vivoとin vitro、ゼブラフィッシュとヒトに共通した治療メカニズムを解明した。

到目前为止，我们已经成功地构建了饮食肥胖模型斑马鱼（Oka等人BMC生理学，2010年），并使用此过程进行了体内筛查，并报告了这种结果（Tainaka等，Lipid＆Amepolist，2011年）。本研究提出，集中于eriocitrin，这是一组具有抗肥胖作用的化合物，其作用机理仍然未知，旨在全面阐明饮食肥胖斑马鱼（体内）和人类培养细胞（体外）的作用机理。具体而言，在第一年，在确认了筛选实验结果的可重复性之后，该机制将根据斑马鱼衍生的脂肪组织中的综合基因表达分析进行估算，第二年，该机制将从斑马鱼和人培养的细胞系（liver and dipose Compursor Cell）进行验证。今年，对饮食肥胖模型进行了两个给药实验，并在第一个实验中证实了可重复性。在接受口服eliocitriin的组中，对体重增加没有影响，但是血脂参数显着改善，并且抑制了肝脏脂肪的积累。在第二个实验中，进行了脂肪组织的综合基因表达分析（DNA微阵列）进行表达分析（内脏脂肪和肝脏）。使用子网富集分析从途径分析中估算该机制。此外，使用人培养的细胞系进行了验证实验，以阐明斑马鱼预测的Eliocitriin血脂异常的机制以及斑马鱼和人类共有的机制。