ＲＯＣＫ阻害による開口放出機構の調節を介した不安惹起メカニズムの解明

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これまでに、Rhoキナーゼ(ROCK)阻害剤のマウス脳室内投与により、不安様行動が惹起することを明らかにした。ROCK活性の調節により恐怖条件付け試験ですくみ行動が変化することから、ROCKが学習や記憶、情動に関与することが報告された。そのメカニズムとしてアクチン骨格の再構成によるスパインの形態変化とシナプス接続の変化が推測されているが明らかとされていない。近年、ROCKはsyntaxin-1のリン酸化を促し、シナプス小胞のプレシナプス膜への融合を調節し神経伝達物質の開口放出を制御していることが報告された。そこで本研究では、ROCK調節を介した不安惹起メカニズムを、プレシナプス神経伝達物質の開口放出機構に着目して検討することを目的とした。はじめに、マウスにROCKを活性化させるリゾホスファチジン酸(LPA)を脳室内投与したときの行動変化を、種々の評価系を用いて検討した。恐怖条件付け試験、強制水泳試験を行った結果、LPAの脳室内投与により情動行動変化が認められた。一方、Ｙ字迷路試験では変化が認められなかったことから、LPAは記憶には影響しないことが明らかとなった。次にLPA 脳室内投与後のマウス脳を摘出し、前頭葉、海馬に分割し、各部位でのROCK及びROCKシグナル経路の下流タンパク質であるLIMキナーゼ、ミオシンフォスファターゼ、cofilinとそのリン酸化体、syntaxin-1とそのリン酸化体、LPAシグナルを調節するPrg1の発現解析をWestern blot法により行ったが、対照と比較して有意な変化は検出されなかった。以上のことから、ROCKシグナル伝達系は、記憶には影響せずに情動行動を調節することが明らかとなった。またそのメカニズムとして仮説したプレシナプスの神経伝達物質開口放出機構の変化については、前頭葉、海馬以外の脳部位が関与する可能性が考えられた。