ｃ－Ｍｅｔ遺伝子機能解析による子宮体部漿液性腺癌に対する新たな分子標的薬開発

通过c-Met基因功能分析开发子宫体浆液性腺癌新分子靶点药物

• 批准号: 24791679
• 负责人: 丹野 純香
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24791679/
• 关键词: 癌; 子宮体癌; 漿液性腺癌; 分子標的治療; MET

本研究は、オンコジーンであるc-Met遺伝子が子宮体部漿液性腺癌（漿液性腺癌）においても癌の進展に寄与し、その阻害剤が分子標的治療薬に応用できるのではないかと考えられる。昨年までにc-Met遺伝子は臨床検体においてその発現が上昇することが分かった。本年度では、漿液性腺癌でのc-Met遺伝子の機能を明らかにするために、漿液性腺癌由来細胞株であるUSPC-1細胞にc-Met遺伝子のsiRNAによってのダウンレギュレーションを行い、それらの細胞の機能の解析を行った。漿液性腺癌細胞株におけるc-Met遺伝子の機能解析：昨年までに作成したsiRNAを用いて漿液性腺癌細胞株におけるc-Met遺伝子を抑制の機能解析を行った。WST-assayによりsiRNA導入群で対照群に比較し顕著に細胞増殖能を抑制することがわかった。またFACSによる細胞周期の解析では導入群においてG1期の細胞が増加（対照：39.9%、導入：50.4%）し、G1アレストを誘導することが確認され、subG1期の細胞も増加（対照：3.1%、導入：7.1%）した。またFACSでのAnnexin-V陽性細胞の解析では導入群において陽性細胞数の上昇（対照：3.5%、導入：6.3%）が確認された。さらにBoyden chamberを用いたmigration-assayでは遊走細胞数は導入群で有意に減少（52.1%、p=0.0016）した。以上より、漿液性腺癌細胞にいてc-Met遺伝子の発現抑制は細胞増殖の抑制および細胞周期の停滞、アポトーシス誘導、遊走能の減少を引き起こすことが分かった。このことから癌細胞ではc-Met遺伝子の発現亢進が癌細胞の進展に影響していると示唆された。

This study aims to investigate the role of c-Met gene in the progression of uterine serous adenocarcinoma (USCC) and its molecular targets in the treatment of USCC. The c-Met gene has increased in clinical manifestations since last year. This year, the function of c-Met gene in human serous adenocarcinoma cells was clarified, and the function of c-Met gene siRNA in USPC-1 cells was analyzed. Functional Analysis of c-Met Gene in Serous Adenocarcinoma Cell Lines: Functional Analysis of Inhibition of c-Met Gene in Serous Adenocarcinoma Cell Lines by siRNA Made Last Year WST-assay siRNAs introduced into the population were compared to the control group and the inhibition of cell proliferation was observed. Cell cycle analysis by FACS showed an increase in cells in G1 phase (control: 39.9%, introduction: 50.4%), an increase in cells in G1 phase (control: 3.1%, introduction: 7.1%), and an increase in cells in subG1 phase (control: 3.1%, introduction: 7.1%). Analysis of Annexin-V positive cells by FACS confirmed an increase in the number of Annexin-V positive cells in the introduced population (control: 3.5%, introduction: 6.3%). The number of migrating cells in the Boyden chamber was intentionally reduced (52.1%, p=0.0016). The above results show that the inhibition of c-Met gene expression in serous adenocarcinoma cells, the inhibition of cell proliferation, the arrest of cell cycle, the induction of cell cycle, and the reduction of migration energy are both important factors. The expression of c-Met gene in cancer cells is increased, which affects the progression of cancer cells.