ｃ－Ｍｅｔ遺伝子機能解析による子宮体部漿液性腺癌に対する新たな分子標的薬開発

通过c-Met基因功能分析开发子宫体浆液性腺癌新分子靶点药物

• 批准号: 24791679
• 负责人: 丹野 純香
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24791679/
• 关键词: 癌; 子宮体癌; 漿液性腺癌; 分子標的治療; MET

本研究は、オンコジーンであるc-Met遺伝子が子宮体部漿液性腺癌（漿液性腺癌）においても癌の進展に寄与し、その阻害剤が分子標的治療薬に応用できるのではないかと考えられる。昨年までにc-Met遺伝子は臨床検体においてその発現が上昇することが分かった。本年度では、漿液性腺癌でのc-Met遺伝子の機能を明らかにするために、漿液性腺癌由来細胞株であるUSPC-1細胞にc-Met遺伝子のsiRNAによってのダウンレギュレーションを行い、それらの細胞の機能の解析を行った。漿液性腺癌細胞株におけるc-Met遺伝子の機能解析：昨年までに作成したsiRNAを用いて漿液性腺癌細胞株におけるc-Met遺伝子を抑制の機能解析を行った。WST-assayによりsiRNA導入群で対照群に比較し顕著に細胞増殖能を抑制することがわかった。またFACSによる細胞周期の解析では導入群においてG1期の細胞が増加（対照：39.9%、導入：50.4%）し、G1アレストを誘導することが確認され、subG1期の細胞も増加（対照：3.1%、導入：7.1%）した。またFACSでのAnnexin-V陽性細胞の解析では導入群において陽性細胞数の上昇（対照：3.5%、導入：6.3%）が確認された。さらにBoyden chamberを用いたmigration-assayでは遊走細胞数は導入群で有意に減少（52.1%、p=0.0016）した。以上より、漿液性腺癌細胞にいてc-Met遺伝子の発現抑制は細胞増殖の抑制および細胞周期の停滞、アポトーシス誘導、遊走能の減少を引き起こすことが分かった。このことから癌細胞ではc-Met遺伝子の発現亢進が癌細胞の進展に影響していると示唆された。

这项研究表明，癌基因C-MET基因也有助于子宫浆膜腺癌（血清癌腺癌）中癌症的进展，并且该基因的抑制剂可以应用于分子靶向治疗剂。到去年，发现C-MET基因在临床标本中增加了。在今年，为了阐明C-MET基因在浆液腺癌中的功能，USPC-1细胞（一种衍生自浆液性腺癌的细胞系），使用siRNA对C-MET基因的下调进行了分析以分析这些细胞的功能。浆液腺癌细胞系中C-MET基因的功能分析：对C-MET基因在浆液腺癌细胞系中抑制C-MET基因抑制的功能分析是使用去年创建的SIRNA进行的。 WST-save表明，与对照组相比，siRNA传递组显着抑制了细胞增殖能力。此外，使用FACS的细胞周期分析证实，传感器组的G1相细胞增加（对照：39.9％，传感器：50.4％），导致G1停滞，而SUBG1相细胞增加（对照：3.1％，换能器：7.1％）。此外，使用FACS对膜联蛋白V阳性细胞进行分析证实了转导组中阳性细胞数量的增加（对照：3.5％，转导：6.3％）。此外，使用博伊登室的迁移 - 迁移显着减少了传感器组中迁移细胞的数量（52.1％，p = 0.0016）。从上面的情况下，发现C-MET基因在浆液腺癌细胞中表达的抑制会导致细胞增殖，停滞，细胞周期停滞，诱导凋亡以及迁移潜力的减少。这表明C-MET基因的表达增加会影响癌细胞中癌细胞的进展。