プロテオーム解析を用いた脱髄型ギラン・バレー症候群の新規標的分子の網羅的解析

利用蛋白质组学分析全面分析脱髓鞘格林-巴利综合征的新靶分子

• 批准号: 25461268
• 负责人: 澤井 摂
• 金额: $ 3.24万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25461268/
• 关键词: ギラン・バレー症候群; 自己抗体; プロテオーム解析

本研究は、脱髄型ギラン・バレー症候群(GBS)における自己免疫の標的分子を、プロテオーム解析の手法により同定し、その病態解明とそれに基づく新規治療法を開発することを目的とした。脱髄型ギラン・バレー症候群の標的分子は、これまでの知見から、末梢神経ミエリンの構成蛋白質でなく、Schwann細胞外層表面に発現する蛋白質であると予想される。これまでに我々は、schwannoma細胞株から抽出した蛋白質を2次元電気泳動で分離し、Western Blottingによりサイトメガロウイルス感染後の脱髄型GBS患者血清中IgGと免疫反応する蛋白質を、質量分析計で解析することでmoesinを同定した。抗moesin抗体はGBS40症例中7症例で陽性となり、陽性例にサイトメガロウイルス感染後の6症例のうち5症例が含まれていた。MoesinはSchwann細胞のmicrovilliに局在し、髄鞘化との関連が報告されており、抗moesin抗体の病態への関連が示唆された。本研究ではさらに、サイトメガロウイルス以外の先行感染起因病原体による免疫標的蛋白質を探索するため、免疫沈降法を用いた手法で解析を行った。これは、schwannoma細胞に直接血清を添加し、自己抗体を細胞表面の標的分子と結合させ、その結合が壊れないようにBufferで細胞を緩やかに破砕し、プロテインGビーズを用いて抗原が結合した状態で自己抗体を回収し、抗体と結合する抗原を質量分析計で解析する手法である。質量分析計による蛋白質同定は、サンプル溶解液中の蛋白質を酵素消化でペプチドにして、液体クロマトグラフィーで分離した後、高分解能の質量分析計で解析するショットガン解析を行った。これまでに本手法により、先行感染がサイトメガロウイルス以外の病原体による1症例で、約300個の蛋白質が同定され、このうち約50個が膜蛋白質であった。

In this study, GBS was used to detect the molecular weight of self-immune antibody, to analyze the method of homology, and to explain the basic rules and regulations of the disease. The purpose of this study is to introduce the new rules and regulations. The molecular, cognitive, terminal, extracellular protein, Schwann, and extracellular proteins were detected on the extracellular surface of the exocrine syndrome. IgG immunoreactive protein was detected in the sera of patients with runaway GBS after infection, and IgG immunoreactivity was detected in the sera of patients with exudative GBS after infection. IgG immunoreactivity was detected in the serum of patients with GBS after infection. Quantitative analysis and quantitative analysis were performed to analyze the expression of IgG protein in the serum of patients with shedding GBS. Among the anti-moesin antibody GBS40 disease cases, 7 cases had sexual symptoms and 5 cases had sexual symptoms after infection. Moesin

项目成果

プロテオーム解析を用いた脱髄型ギラン・バレー症候群の免疫標的分子の探索

利用蛋白质组分析寻找脱髓鞘性格林-巴利综合征的免疫靶分子

• 发表时间: 2013
• 作者: 澤井 摂;佐藤守;森雅裕;三澤園子;風見隆浩;別府美奈子;関口縁;野村文夫;桑原聡
• 通讯作者: 桑原聡

Serum cytokine profiles of chronic inflammatory demyellinating polyneuropathy.

慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病的血清细胞因子谱。

• 发表时间: 2013
• 作者: Beppu M;Sawai S;Misawa S;Sogawa K;Ishige T;Satoh M;Mori M;Nomura F;Kuwabara S
• 通讯作者: Kuwabara S

Multiple genetic testing of 10 types of autosomal dominant spinocerebellar ataxias by multiplex PCR and repeat-primed PCR.

通过多重 PCR 和重复引发 PCR 对 10 种常染色体显性脊髓小脑共济失调进行多重基因检测。

• 发表时间: 2013
• 作者: Sawai S;Ishige T;Itoga S;Sato K;Utsuno E;Beppu M;Nishimura M;Matsushita K;Kuwabara S;Nomura F.
• 通讯作者: Nomura F.