歯根膜特異的分子PLAP-1遺伝子多型の歯周病疾患感受性への関与

牙周膜特异性分子PLAP-1基因多态性与牙周病易感性的关系

• 批准号: 25862047
• 负责人: 梶川 哲宏
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25862047/
• 关键词: PLAP-1遺伝子多型; 歯周病疾患感受性

1)in vivo 歯周炎-PLAP-1遺伝子多型解析モデルの構築a)マウス歯周炎モデルを用いたin vivoにおけるPLAP-1の機能解析はじめに、C57BL/6 野生型マウスの第二臼歯に対し、Porphyromonas gingivalis(P.g.)を一晩浸漬した絹糸を結紮し、絹糸を結紮した状態で2週間飼育、さらに2週間後に絹糸の除去を行い、絹糸結紮後、2、3、4週間経過した同部位の骨レベルをマイクロCTを用いて解析した。コントロール群として、カルボキシルセルロースを浸漬した絹糸を用いた。その結果、絹糸結紮後、4週間後のマイクロCT解析において、コントロール群と比較し、P.g.群で有意に骨レベルが低いことが明らかとなった。次に、当教室で樹立に成功しているPLAP-1 KOマウスに対し、上記のマウス歯周炎モデルを適応し、野生型マウスと比較・検討した。その結果、P.g.を浸漬した絹糸を用いた際、野生型マウス群と比較し、PLAP-1 KOマウス群において有意に骨レベルが高いことがわかった。これらのマウスの歯肉からmRNAを回収し、リアルタイムPCR法を用いて炎症性サイトカインの発現の検討を行った結果、PLAP-1 KOマウス群においてCXCL10の発現が低いことがわかった。これらのマウスの微細環境で生じている現象について、さらなる詳細な検討が必要である。b)マウス歯周炎モデルにおけるPLAP-1遺伝子多型と炎症応答の関連の検討D13型PLAP-1,D14型PLAP-1を発現する5次アデノウイルスの作製を行った。この作製したアデノウイルスを濃縮・精製し、PLAP-1 KOマウス周囲歯肉に感染させることで、PLAP-1遺伝子多型と歯周炎炎症応答の関連を詳細に検討する必要がある。

1) Construction of the in vivo periodontitis-PLAP-1 gene polymorphism analysis model a) Functional analysis of PLAP-1 in vivo using the periodontitis model Introduction, silk threads that have been soaked overnight with Porphyromonas gingivalis (P.g.) were ligated to the second molars of C57BL/6 wild-type mice, and kept for 2 weeks in a state where the silk thread was ligated, and the silk thread was 2周后删除。连接丝线后，使用Microct分析了同一部位的骨骼水平。作为对照组，使用了用羧基纤维素浸泡的丝线。结果，在丝绸连接后4周的Microct分析中，据显示，P.G.骨水平明显降低。组与对照组相比。接下来，我们将上述牙周炎模型调整为PLAP-1 KO小鼠，这些小鼠已在我们的课堂上成功建立，并与野生型小鼠进行了比较和检查。结果表明，当P.G.被浸泡，与野生型小鼠组相比，PLAP-1 KO小鼠组的骨骼水平明显更高。从这些小鼠的牙龈中收集mRNA，并使用实时PCR研究了炎性细胞因子的表达，发现PLAP-1 KO小鼠组中CXCL10表达较低。这些小鼠的微环境中发生的现象需要进一步的详细检查。 b）检查鼠牙周炎模型中PLAP-1基因多态性与炎症反应之间的关系。产生了表达D13 PLAP-1和D14 PLAP-1的第五个腺病毒。通过富集和纯化产生的腺病毒，并感染Perigusa PLAP-1 KO小鼠，有必要详细检查PLAP-1基因多态性与牙周炎炎症反应之间的关联。