選択的リグニン分解性担子菌の脂質代謝関連酵素遺伝子の機能解析

选择性木质素降解担子菌脂质代谢相关酶基因的功能分析

• 批准号: 08J00629
• 负责人: 津田 冴子
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J00629/
• 关键词: 白色腐朽菌; 選択的リグニン分解; 脂質代謝

本研究は,リグニン分解性担子菌の一種であるCeriporiopsis subvermisporaが有するユニークな選択的リグニン分解機構を分子レベルで解明することを目指し,本機構への関与が強く示唆される脂質代謝関連酵素遺伝子の機能解析を目的とした.今年度は,これまでにC.subvermisporaから単離した脂肪酸不飽和化酵素,脂肪酸合成酵素,アセチル-CoAカルボキシル基転移酵素,長鎖脂肪酸活性化酵素をコードする遺伝子について,さまざまな培養条件下での転写解析をおこなった.その結果,リグニンフラグメントの一種を培地に添加すると,とくに脂肪酸不飽和化酵素遺伝子の転写誘導が顕著となることが分かった.それに加えて,他の脂質代謝関連酵素遺伝子のうち,数種類の転写が誘導されることも明らかとなった.実際,リグニンフラグメント添加時には菌体成長,リグニン分解酵素活性,そして,長鎖不飽和脂肪酸の産生量が促進される.これらの現象と今回の酵素遺伝子の転写誘導は選択的リグニン分解のプレーヤーである脂質代謝物の生合成系の促進と密接に関係していると考えられ,極めて興味深い.さらに,単一の刺激で複数の脂質代謝関連酵素遺伝子の転写が誘導されるという今回の結果については,複数の遺伝子の転写を同調的に誘導させる何らかの転写制御因子の関与が予想される.一方,長鎖脂肪酸活性化酵素については大腸菌での高発現および精製に成功した.

The purpose of this study is to elucidate the molecular structure of a kind of decomposing basidiomycete, Ceriporiopsis subvermispora, and to elucidate the function of enzymes related to lipid metabolism. In this year, C.subvermispora is isolated from fatty acid unsaturated enzymes, fatty acid synthase enzymes, alpha-CoA enzyme, long-chain fatty acid activating enzymes, and the analysis of fatty acid activity under culture conditions. As a result, a kind of Ligunifragmat was added to the culture, which significantly increased the transcription induction of fatty acid unsaturating enzyme genes. In addition, there are several kinds of lipid metabolism-related enzyme genes that can be induced. In fact, the growth of bacteria, the activity of enzymes, and the production of long-chain unsaturated fatty acids were promoted when the medium was added. This phenomenon is related to the promotion of lipid metabolism by enzyme gene expression, which is very interesting. In addition, a single stimulus induces the transcription of multiple enzymes involved in lipid metabolism. On the one hand, long-chain fatty acid activating enzymes are highly active and refined successfully against E. coli.

项目成果

選択的白色腐朽菌 Ceriporiopsis subvermispora の脂質代謝関連酵素遺伝子の単離と転写解析

选择性白腐真菌Ceriporiopsis subvermispora脂质代谢相关酶基因的分离及转录分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 合原一究;水本武志;武田龍;大塚琢馬;高橋徹;奥乃博;合原一究;合原一究;Takeshi Ohbuchi;Takeshi Ohbuchi;津田冴子
• 通讯作者: 津田冴子