新規シロイヌナズナ試験管内翻訳系を用いたCGS転写後制御機構の遺伝生化学的研究

使用新型拟南芥体外翻译系统进行 CGS 转录后控制机制的遗传生化研究

• 批准号: 08J00643
• 负责人: 室田 勝功
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J00643/
• 关键词: 転写後制御; 翻訳アレスト; シロイヌナズナ; 試験管内翻訳系; mRNA安定性制御; 分子生物学

シロイヌナズナのシスタチオニンγ-シンターゼ(CGS)をコードする遺伝子(CGS1)は、S-アデノシルメチオニン(SAM)に応答した翻訳アレストと、それに共役したmRNA分解によって発現が制御される。本研究では、CGS遺伝子の発現制御に関わる因子の単離・同定を目的として、以下の研究を行った。1.酵母において翻訳アレストと共役したmRNA分解機構として報告されているNo-Go decayの因子、Dom34pとHbs1pについて、シロイヌナズナのホモログを検索した。Dom34pと類似性の高いタンパク質をコードする遺伝子としてAt4G27650とAt3G58390の2遺伝子、Hbs1pについてはAt5G10630とAt1G03360の2遺伝子に注目し、T-DNA挿入による遺伝子破壊株を入手した。これらの変異株の細胞抽出液を用いた試験管内翻訳系による解析では、CGS1 mRNAの分解に各ホモログ遺伝子の破壊による影響は見られなかった。2.CGS1 mRNAの分解に関わる因子を生化学的に同定するために、分解の起こりにくい系であるウサギ網状赤血球抽出液を用いて、分解活性を指標に分解因子を追うためのアッセイ系を構築した。今後、この系を用いた分解因子の単離・精製が期待される。

CGS (CGS1) and SAM (SAM) were used to control the expression of CGS mRNA. This study is aimed at identifying factors related to the development of CGS genes. 1. Yeast mRNA decomposition mechanism is reported in No-Go Decay Factor, Dom34p and Hbs1p, and the mRNA decomposition mechanism is reported in No-Go Decay Factor. Dom34p, similarity and high quality of the two genes At4G27650 and At3G58390, Hbs1p, At5G10630 and At1G 03360, T-DNA insertion, T-DNA insertion, T-DNA insertion, The cell extracts of these different plants were used to analyze the expression of CGS1 mRNA in vitro and to analyze the expression of CGS1 mRNA in vitro 2. CGS1 mRNA decomposition related factors biochemical identity, decomposition initiation system, reticulocyte extract, decomposition activity indicators, decomposition factors, and system construction. In the future, this system will be used to decompose factors and refine expectations.

项目成果

シロイヌナズナ細胞抽出液を用いたシスタチオニンγ-シンターゼの転写後制御機構の遺伝生化学的解析

使用拟南芥细胞提取物对胱硫醚 γ-合酶转录后控制机制进行遗传和生化分析

• 发表时间: 2008
• 作者: Morimoto;A.;Ma;N.;Uchiyama;S.;Matsunaga;S.;Fukui;K.;内藤哲;長谷川傑;室田勝功
• 通讯作者: 室田勝功

新生ペプチドによる翻訳伸長の停止と共役したmRNA分解

mRNA 降解与新生肽翻译延伸终止相结合

• 发表时间: 2009
• 作者: Morimoto;A.;Ma;N.;Uchiyama;S.;Matsunaga;S.;Fukui;K.;内藤哲
• 通讯作者: 内藤哲

リボソームから見たシスタチオニンγ-シンターゼ遺伝子の翻訳アレストとmRNA分解の研究

从核糖体角度研究胱硫醚γ-合酶基因的翻译停滞和mRNA降解

• 发表时间: 2008
• 作者: Morimoto;A.;Ma;N.;Uchiyama;S.;Matsunaga;S.;Fukui;K.;内藤哲;長谷川傑
• 通讯作者: 長谷川傑