コンデンシンによるクロマチン高次構造変換を介した寿命制御機構の解析

凝缩蛋白介导的染色质构象转变介导的寿命控制机制分析

• 批准号: 08J01262
• 负责人: 川島 愛 (竹本 愛)
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J01262/
• 关键词: 染色体; コンデンシン; M期; 間期; ATPase; 凝縮; クロマチン; 阻害剤; 核小体; rDNA; ヒストン修飾; クロマチン高次構造; rRNA転写; 寿命; 哺乳類細胞

本研究では、M期染色体を制御するコンデンシンによる間期クロマチン機能へ関与、特に転写制御、DNA修復への影響の解析を目的としてきた。これまでに、ヒトコンデンシンが間期細胞で核小体に存在していること、さらに核小体rDNAのnon-coding領域とcoding領域のどちらにも広く結合していることがわかった。コンデンシンをRNAiでノックダウンしたところ、ヒストン修飾の変化とともに、rRNA転写が促進されていることが確認された。したがって、コンデンシンが間期核小体においてクロマチン制御に関与していることが示唆された。M期のコンデンシン機能はATPase活性が重要とされている。一方で、間期クロマチン機能におけるコンデンシンのATPase活性の要求性は明らかではない。本年度では引き続き、コンデンシンの間期機能の解析とその機能におけるATP水解エネルギーを介したクロマチン高次構造変換の重要性を検討するために、酵母を用いた研究計画を進めた。上述のようにM期コンデンシンの染色体構築機能にはATPase活性が必要で、その変異は致死となるため、ATPase変異株は解析に使えない。阻害剤により間期特異的にATPase活性を阻害し、コンデンシンの間期機能の解析を行うことが有効と考えた。しかしコンデンシンの阻害剤は、そのATPaseをターゲットとしたものはもちろん、皆無である。そこで、分裂酵母のコンデンシンサブユニットCut3のATP結合ポケットを広げた変異体を作製し、野生株に比べこの変異株の生育を阻害するような低分子化合物のスクリーニングを行った。変異株特異的に生育を抑制した10種のうち、1つの化合物処理により細胞がコンデンシン阻害の表現型cutを示した。しかしながら、この阻害剤のターゲットとしてAurora kinaseが同定された。Aurora kinaseはコンデンシンのM期の制御因子であることから、このスクリーニングによりコンデンシン経路の阻害剤がとれる可能性が示唆された。引き続き、間期機能の解析に使えるコンデンシン阻害剤のスクリーニングを行っている。

The purpose of this study is to analyze the relationship between chromosome function and DNA repair in M and M phases. In addition, the non-coding domain of nucleosome rDNA and the coding domain of nucleosome rDNA exist in interphase cells. For example, if you want to identify a gene, you can use it to identify the gene. The first step is to control the nuclear system and the second step is to control the nuclear system The function of M-phase ATPase is very important for the development of M-phase ATPase. The activity of ATPase is required for the function of the enzyme. This year, we will discuss the importance of ATP hydrolysis and high-level structural transformation. The chromosome construction function of M phase is necessary for ATPase activity, and different strains are analyzed. Inhibition of Interval-Specific ATPase Activity Inhibition of Interval-Specific ATPase Activity The enzyme is not present in the cell. The growth inhibition effect of ATP binding protein on wild and split yeast was studied. 10 kinds of plant specific growth inhibition, 1 kind of compound treatment, cell growth inhibition and phenotype cut were shown. Aurora kinase is the same as Aurora kinase. Aurora kinase is the control factor of the M phase of the system, and the possibility of the inhibition factor of the system is indicated. The analysis of the function of the switch and the interval makes it possible to change the switch of the resistor.

项目成果

PP2AによるコンデンシンIIの局在制御

PP2A 对凝缩蛋白 II 的定位控制

• 发表时间: 2009
• 作者: 竹本愛;前島一博;池原強;花岡文雄;柳澤純;木村圭志
• 通讯作者: 木村圭志

The chromosomal localization of condensin II is regulated by anon-catalytic action of PP2A

凝缩蛋白 II 的染色体定位受 PP2A 的非催化作用调节

• 发表时间: 2010
• 作者: Takemoto A;Maeshima K;Ikehara T;Hanaoka F;Yanagisawa J;Kimura K
• 通讯作者: Kimura K

間期におけるコンデンシンの機能解析

凝集素在间期的功能分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 山口量光;竹本愛;柳澤純;木村圭志
• 通讯作者: 木村圭志

PP2AによるコンデンシンIIの染色体局在制御

PP2A 对凝缩蛋白 II 染色体定位的控制

• 发表时间: 2010
• 作者: 竹本愛;前島一博;池原強;山口量光;花岡文雄;柳澤純;木村圭志
• 通讯作者: 木村圭志

The chromosomal association of condensin 11 is regulated by a noncatalytic function of PP2A

凝缩蛋白 11 的染色体关联受 PP2A 的非催化功能调节

• 发表时间: 2009
• 期刊: Nature Structural & Molecular Biology 16
• 作者: Takemoto A;Maeshima K;Ikehara T;Yamaguchi K;Murayama A;Imamura S;Imamoto N;Yokoyama S;Hirano T;Watanabe Y;Hanaoka F;Yanagisawa J;Kimura K.
• 通讯作者: Kimura K.