出芽酵母における新規細胞質局在化RNAの局在化機構と生理的意義の解明

点击翻译按钮获取中文摘要

細胞内におけるRNAの局在化は、RNAの翻訳制御を介して遺伝子発現を調節する。これまでに酵母からヒトに至るまで、多くの生物種で局在化RNAの例は知られている。しかし、その詳細が解析されている例は少なく、局在化RNA機構の全容は明らかとなっていない。RNAを可視化する方法を用い、局在化RNAのスクリーニングにおいて新規に同定した出芽酵母の局在化EGD1 mRNAは、細胞質に大きく凝集した局在を示す。この細胞質への特徴的な局在化にはEGD1 mRNAの5'上流領域及びEgdlpへの翻訳が必要であり、凝集したEGD1 mRNAはEgdlp及びRNAの代謝に関わるP-body因子と共局在していることが明らかになった。また、この局在構造(EGD1顆粒と命名)は、阻害剤を用いた解析により、微小管依存的に形成されていることが示された。今年度はEGD1顆粒の生物学的意義を解明するため、恒常的に強く発現するTDH3(GAPDH)プロモーター制御下で、EGD1を発現させた場合における細胞への影響を調べた。その結果、EGD1 mRNAの5'上流領域の不足によりEGD1顆粒を形成できない細胞では、vector及びEGD1顆粒を形成できる細胞と比較して強い生育阻害や縦長化や肥大化などの細胞形態変化が見られた。このEGD1顆粒形成不全による細胞形態の変化については、EGD1顆粒を形成できるプラスミドを細胞内で共発現させると改善が見られた。よって、EGD1顆粒の形成が細胞の機能にとって重要な役割を持つことが示唆された。