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平面内細胞極性における非典型的カドヘリンと微小管の役割

非典型钙粘蛋白和微管在平面细胞极性中的作用

基本信息

批准号：
08J05086
负责人：
毛利亘輔
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度に引き続き、コヒーシン複合体のサブユニットのひとつ、SMC3について平面内細胞極性(PCP)における機能を解析した。モザイク解析を用い蛹期の翅でSMC3変異体のクローンを作成すると、Fmiタンパク質の量が上昇していた。平面内細胞極性に関与する他の遺伝子についてその発現を抗体染色法により確認したところ、FrizzledとDachsousの発現量に変化は見られなかった。また、BasolateralのマーカーであるDlgを抗体染色したところ、こちらも顕著な異常は見られなかった。Fmiの発現上昇が転写調節によるものかどうかを確認するため、リアルタイムPCR法を用い、fmi遺伝子の転写が変動しているかを調べた。三齢後期の幼虫の翅成虫原基を野生型とSMC3ノックダウン系統それぞれから採取してRNAを調整してリアルタイムPCRのサンプルとした。リアルタイムPCRの結果野生型とSMC3ノックダウン系統でfmi転写量の変動は見られなかった。fmiの発現量を別の方法で定量するため、in-situハイブリダイゼーション法を用いて蛹期の翅におけるfmi発現変動を調べた。ptc-GAL4を用いて翅の一部領域でSMC3をノックダウンし、fmiプローブを用いて血fmi発現変動の検出を試みたが、顕著な変化は見られなかった。SMC3ノックダウンにおけるfmiは転写量の変化ではなく、タンパク質の安定性などが変化している可能性もある。これらの成果は、PCP研究はもとより、コヒーシンの転写制御における機能を解析する上でも非常に意義を持つ。

The previous year, we analyzed the function of PCP in SMC3. The quality of SMC3 is increasing. In plane cell polarity is related to other genes, and antibody staining is used to confirm the presence of Frizzled and Dachsous. Basolateral Dlg antibody staining Fmi occurrence increases, Fmi occurrence increases, Fmi occurrence increases, The primordia of larvae and adults in the late stage of trisomy are wild-type and SMC3 is a system of RNA regulation. The results of wild type SMC3 were obtained by PCR. Fmi generation is regulated by quantitative and in-situ methods. ptc-GAL4 is used in a part of the field, SMC3 is used in a part of the field, and fmi is used in a part of the field. SMC3 has the possibility of changing the amount of writing and the stability of the quality. The results of PCP research are very important for the analysis of the function of writing and controlling.