癌抑制遺伝子産物APCによるG蛋白質の制御機構の解析

抑癌基因产物APC对G蛋白的调控机制分析

• 批准号: 08J06734
• 负责人: 相良 将樹
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J06734/
• 关键词: APC; GEF; 細胞運動; Spinophilin; 大腸菌

Asef2と、Asef2の結合蛋白質としてこれまでに同定したSpinophilin、およびAPCの機能を解析するため、三者が肝細胞増殖因子(HGF)シグナルの下流で働いている可能性を検討した。免疫染色により、Asef2、Spinophilin、APCのHeLa細胞における細胞内局在を検討した。その結果、Asef2は細胞質に局在が観察され、Spinophilinは細胞質や細胞膜に局在が観察され、APCや細胞質や細胞膜の突起に局在が観察された。HGFにより細胞を刺激すると、Asef2、Spinophilin、APCはHGF刺激により誘導されるラメリポディアやラッフル膜に濃縮し、三者は共局在することがわかった。また、RNAiによりAsef2、Spinophilin、APCの発現をそれぞれ抑制すると、HGF依存的な細胞運動が抑制された。また、Spinophilinの発現を抑制すると、Asef2の活性型変異体の発現により形成されるフィロポディアの数が減少した。一方、SpinophilinがAsef2のGEF活性に与える影響を検討したところ、SpinophilinはAsef2のGEF活性を制御しないことがわかった。これらの結果から、Asef2、Spinophilin、APCはHGF刺激依存的な細胞運動制御に関与しており、SpinophilinはAsef2と結合することでアクチン細胞骨格系を協調的に制御する足場蛋白質として働いていると考えられた。

Asef2 and Asef2 binding proteins are identified in the same way as Spinophilia and APC. The possibility of their interaction with hepatocyte growth factor (HGF) is discussed. Immunostaining, Asef2, Spinophilia, APC and HeLa cells were examined in vivo. Asef2 is observed in cytoplasm, Spinophilus is observed in cytoplasm, APC is observed in cytoplasm and processes. HGF stimulates cells, Asef2, Spinophilus and APC to induce HGF. RNAi, Asef2, Spinophilia, APC and HGF-dependent cell movements are inhibited. In addition, the production of Spinophilin was inhibited, and the production of active forms of Asef2 was reduced. One side, Spinophilia Asef2 GEF activity and influence, Spinophilia Asef2 GEF activity control Asef2, Spinophilus, APC are the key factors in regulating cell movement dependent on HGF stimulation.

项目成果

Role of Asef2, a guanine-nucleotide exchange factor specific for Rac1 and Cdc42

Asef2（一种针对 Rac1 和 Cdc42 的鸟嘌呤核苷酸交换因子）的作用

• 发表时间: 2008
• 作者: 相良将樹;川崎善博;秋山徹
• 通讯作者: 秋山徹