拡散テンソル画像を用いた末梢神経損傷評価の確立と徐放化栄養因子含有人工神経の開発

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案験計画1:拡散テンソルトラクトグラフィ-(DTT)の相関性と臨床応用末梢神経の損傷動態を視覚化する方法としてDTTに着目し、その検証を行ってきた(Takagi et al.NeuroImage 2009)。さらに臨床用MRIにおいて手根管症候群など末梢神経領域のcommon diseaseにおける病態把握の具体的検討段階に入ったが、現在再現性をより向上させるべく撮像を繰り返しながら適切な設定条件を検討している。実験計画2:徐放化栄養因子含有人工神経の開発成体ラット坐骨神経に15mmのgapを作成しbFGF含有ゼラチンハイドロゲルPGAチューブを移植して自家神経移植と比較した。昨年度の機能解析に引き続きトルイジンブルー染色による組織評価を損傷後16週まで行ったが、自家神経移植以外では良好な再生はみられなかった。この結果より栄養因子のみを用いた人工神経の開発には限界があると考え、細胞移植併用の検討に入った。損傷後末梢神経よりSchwann細胞を単離し、一定の浮遊培養条件下で形成される細胞塊を候補の1つとしてその特性を解明した。成体損傷坐骨神経由来の細胞塊は一部の幹細胞マーカーの染色性には乏しいものの未分化シュワン細胞マーカーに染色されることから未分化なシュワン細胞前駆体である可能性が示唆された。さらにニューロンとの共培養実験では、作成した細胞塊由来の細胞は非損傷坐骨神経から採取したSchwann細胞よりMBP陽性細胞数が多く出現し、神経突起を伸ばす結果となった。以上より未分化なシュワン細胞は生体内では神経再生に重要な役割を果たすことからもこれらの成体自家組織由来の細胞塊は人工神経に含有させるソースとして新たな供給源になり得ると考えられた。