Ko-Kulturexperimente zur Charakterisierung früher embryo-maternaler Interaktionen und deren Störung nach in vitro Fertilisation

共培养实验表征早期胚胎-母体相互作用及其在体外受精后的破坏

基本信息

项目摘要

Die frühe Embryonalentwicklung in utero ist bei verschiedenen Spezies bereits intensiv untersucht worden. Zum Studium der Kommunikationsmechanismen zwischen Embryo und mütterlichem Organismus fehlen dagegen bisher geeignete Untersuchungsmöglichkeiten in vivo wie auch in vitro. Verschiedene Komponenten des Cross-talks zwischen präimplantativen Embryonalstadien und Uteruszellen sollen in diesem Forschungsprojekt systematisch mittels Ko-Kultur von IVP-Rinderembryonen auf Endometriumzellen in einem Perfusionskultursystems in vitro untersucht werden. A) Für die Kultivierung der Uteruszellen u. a. in einem neuartigen Perfusionssystem werden verschiedene Gewinnungsmethoden für die einzelnen Zellfraktionen des bovinen Endometriums verglichen und optimiert. Es werden Zellen aus unterschiedlichen Uterusabschnitten bzw. von Tieren in verschiedenen Zyklusstadien kultiviert. Ferner werden diverse Medien und Seren in unterschiedlichen Konzentrationen untersucht und anhand des Differenzierungsstatus der Zellen mikroskopisch und immunhistochemisch beurteilt. Daneben werden die kultivierten Zellen anhand qualitativer und quantitativer Expression verschiedener Markergene evaluiert. Weiterhin sind Stimulationsversuche mit verschiedenen Hormonen und ein Vergleich mit in vivo-Material geplant. B) In einem zweiten Teilprojekt werden bovine IVP-Embryonen auf den Uteruszellen ko-kultiviert, um so anhand von semi-quantitativen RT-PCR-Untersuchungen die möglichen Komponenten der embryo-maternalen Kommunikation zu identifizieren. Diese Ko-Kultur erfolgt entweder im statischen Petrischalensystem oder in einem speziellen Gradienten-Perfusionscontainer, der eine getrennte Versorgung mit Medien, die auf die unterschiedlichen Ansprüche von Embryonen und Uteruszellen abgestimmt sind, erlaubt.
Die frühe Embryonalentwicklung in utero ist bei verbedenen Spezies bereits intensiv untersucht沃登.胚胎和多种生物器官的抗衰老机制研究在体内和体外都有重要意义。在韦尔登体外灌注培养系统中,使用IVP-Rinderembryonen的体外培养系统进行胚胎和子宫移植的交叉对话。A)Für die Kultivierung der Uteruszellen u. a.在一个中性灌注系统中,韦尔登提供了一种用于牛子宫内膜正常和最佳化的Zellfraktionen方法。这韦尔登是从一个未发育的子宫里出来的。由蒂伦在体育场上表演。在不定期的临床观察中发现韦尔登不同的中、晚期肿瘤,并对肿瘤的显微镜和免疫组化结果进行了分析。Daneben韦尔登通过定性和定量的方法对Zellen进行了多方面的研究。这是一种通过体内激素和物质移植的刺激。B)在韦尔登体外受精胚胎的两个常规项目中,采用半定量RT-PCR方法检测胚胎-母体复合体的主要成分,以进行鉴定。这种文化最终进入了静态的石化系统或一个特殊的灌注容器,通过媒体进行传播,从而使胚胎和子宫的非常规灌注得以实现。

项目成果

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In vitro systems for intercepting early embryo-maternal cross-talk in the bovine oviduct.
用于拦截牛输卵管中早期胚胎-母体串扰的体外系统
  • DOI:
    10.1016/j.theriogenology.2009.09.036
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.8
  • 作者:
    Ulbrich SE;Zitta K;Hiendleder S;Wolf E
  • 通讯作者:
    Wolf E
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