Crystallographic analysis of the FACT-histone complex

FACT-组蛋白复合物的晶体学分析

• 批准号: 20370043
• 负责人: SENDA Toshiya
• 金额: $ 11.9万
• 依托单位: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20370043/
• 关键词: 結晶構造解析; 結晶化; ヒストン; ヌクレオソーム; ヒストンシャペロン; 精製; FACT; 動的光散乱; 大量発現; X線結晶構造解析; ヌクレオソーム構造変換; 大量発現系

FACT, which interacts with the histone H2A-H2B complex, is known to be involved in nucleosome assembly/disassembly. In order to reveal the molecular mechanism of nucleosome assembly/disassembly, crystal structure analysis of FACT was initiated. In the present study, we have established a method that can give about 7 mg of highly purified FACT from 1L culture of insect cell SF+. In addition, a purification method of histone proteins was improved. We confirmed that the purified FACT interacts with the histone proteins. To establish a proper condition for preparing the FACT-histone complex without forming aggregates, solution conditions of the FACT-histone complex were investigated by the dynamic light scattering method. On the basis these results, we are making an effort to obtain crystals of the FACT-histone complex.

FACT与组蛋白H2A-H2B复合物相互作用，已知参与核小体的组装/拆卸。为了揭示核小体组装/拆卸的分子机制，对FACT进行了晶体结构分析。在本研究中，我们建立了一种方法，可以从1L培养的昆虫细胞SF+中获得约7mg的高纯度FACT。此外，还改进了组蛋白的纯化方法。我们证实纯化的FACT与组蛋白相互作用。为了建立不形成聚集体的合适条件制备fact -组蛋白复合物，采用动态光散射法研究了fact -组蛋白复合物的溶液条件。在这些结果的基础上，我们正在努力获得fact -组蛋白复合物的晶体。

项目成果

Crystal structure of Methanococcus jannaschii TATA box-binding protein

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2008.01233.x
• 发表时间: 2008-11-01
• 期刊: GENES TO CELLS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Adachi, Naruhiko;Senda, Miki;Horikoshi, Masami
• 通讯作者: Horikoshi, Masami

Effect of leucine-to-methionine substitutions on the diffraction quality of histone chaperone SET/TAF-Ibeta/INHAT crystals

亮氨酸至蛋氨酸取代对组蛋白伴侣 SET/TAF-Ibeta/INHAT 晶体衍射质量的影响

• 发表时间: 2009
• 作者: 沖田結花里;鴨志田敦;鈴木裕之;伊東健;本橋ほづみ;五十嵐和彦;山本雅之;加藤光保;千田美紀
• 通讯作者: 千田美紀

ヒストンシャペロンCIA-ダブルブロモドメイン複合体のX線結晶構造解析

组蛋白伴侣 CIA-双溴结构域复合物的 X 射线晶体结构分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 井上貴雄;新井洋由;千田俊哉
• 通讯作者: 千田俊哉

Theoretical framework for the histone modification network : modifications in the unstructured histone tails form a scale-free network.

组蛋白修饰网络的理论框架：非结构化组蛋白尾部的修饰形成无标度网络。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Genes Cells 14
• 作者: Hayashi;Y.;Senda;T.;Sano;N. Horikoshi;M.
• 通讯作者: M.

CIA/ASF1を中心としたヌクレオソーム構造変換機構

以CIA/ASF1为中心的核小体结构转换机制

• 发表时间: 2010
• 作者: Tanaka S.;Yoshimoto T.;Naka T.;Nishida K.;Murakami M.;Hirano T.;Nakae S.;Iwakura Y;Cua D.;Kubo M.;千田俊哉
• 通讯作者: 千田俊哉