Mooecular mechanism of protein ubiquitylation, regulated by replication factor, PCNA.

蛋白质泛素化的分子机制，受复制因子 PCNA 调节。

• 批准号: 20770140
• 负责人: YASUSHI Shiomi
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: University of Hyogo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20770140/
• 关键词: 細胞周期; DNA複製; ユビキチン化; タンパク質分解; PCNA

(1) We have constracted baculovirus expression system of CRL4^<Cdt2> ubiqutin ligase, and in vitro ubiquitylation system for Cdt1, p21.(2) We have demonstrated that two conserved amino acid residues within and downstream of the PIP-box are required for degradation in mammalian cells. TD amino acid residues in the PIP-box, and the presence of basic amino acids at +3 and +4 downstream of the PIP box create a degron for CRL4^<Cdt2>. (3) We have analyzed the proteins which interacts with CRL4^<Cdt2> in vivo by mass spectrometry, and found candidates for ubiquitylation by CRL4^<Cdt2>.

(1)构建了CRL4；lt；cdt2&gt；泛素连接酶杆状病毒表达系统和cdt1、p21体外泛素化系统。(2)我们证明了哺乳动物细胞降解PIP-box需要两个保守的氨基酸残基。PIP-盒中的TD氨基酸残基，以及PIP盒下游+3和+4处碱性氨基酸的存在，造成了CRL4^&lt；Cdt2&gt；的降解。(3)对体内与CRL4；lt；Cdt2&gt；相互作用的蛋白质进行了质谱分析，发现了CRL4^&lt；Cdt2&gt；泛素化的候选蛋白质。

项目成果

細胞周期進行に依存したヒトCdt1ユビキチン化と分解制御機構の解析

细胞周期进程依赖性人Cdt1泛素化和降解控制机制分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 塩見泰史;石井健士;村上裕輔;中山潤一;西谷秀男;塩見泰史
• 通讯作者: 塩見泰史

Pre-RC形成および再複製抑制制御機構

Pre-RC形成和再复制抑制控制机制

• 发表时间: 2008
• 期刊: 細胞工学 27(10)
• 作者: 西谷秀男;塩見泰史
• 通讯作者: 塩見泰史

紫外線に応答したヒトCul4-DDB1Cdt2による細胞周期連係因子のユビキチン化と分解機構

人Cul4-DDB1Cdt2响应紫外线对细胞周期相关因子的泛素化和降解机制

• 发表时间: 2009
• 作者: 塩見泰史;石井健士;村上裕輔;中山潤一;西谷秀男
• 通讯作者: 西谷秀男

CDK inhibitor p21 is degraded by a PCNA coupled Cul4-DDB1Cdt2 pathway during S phase and after UV irradiation

CDK 抑制剂 p21 在 S 期和紫外线照射后被 PCNA 偶联的 Cul4-DDB1Cdt2 途径降解

• 发表时间: 2008
• 期刊: J Biol Chem. 283
• 作者: Nishitani H;Shiomi Y;Iida H;Michishita M;Takami T Tsurimoto;T.
• 通讯作者: T.

CDKインヒビターp21の分解による細胞周期の制御

通过降解 CDK 抑制剂 p21 来控制细胞周期

• 发表时间: 2009
• 期刊: 生体の科学 60
• 作者: Masaya Tsuno;Hiroyuki Suzuki and Takumi Noguchi;塩見泰史
• 通讯作者: 塩見泰史