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アレルギー性接触皮膚炎抑制細胞としてのランゲルハンス細胞の機能解析

朗格汉斯细胞作为过敏性接触性皮炎抑制细胞的功能分析

基本信息

批准号：
20790784
负责人：
佐々木喜教
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20790784/
关键词：
ランゲルハンス細胞真皮樹状細胞マイクロアレイ

项目摘要

1. ランゲルハンス細胞、真皮樹状細胞の培養市販の臍帯血由来CD34陽性細胞を用い、無血清培地X-VIVOI5にM-CSF、TNF-a、Flt-3 ligand、stem cell factor、TGF-β1を添加した培養系でランゲルハンス細胞とほぼ同様のphenotypeを有する細胞を分化誘導した。健常人ボランティア由来の末梢血単球をGM-CSF、IL-4添加培地で培養し単球由来樹状細胞を誘導した。2. ランゲルハンス細胞、真皮梅状細胞の網羅的遺伝子解析上記の方法により分化誘導したランゲルハンス細胞、真皮樹状細胞よりRNAを回収して、網羅的遺伝子解析を行った。Agilent社製マイクロアレイシステムにて発現強度のパターンからランゲルハンス細胞と真皮樹状細胞との間で発現強度に違いのある遺伝子を同定した。ランゲルハンス細胞でのみ高発現していることが定説となっている遺伝子(Langerrin、S100、E cadherin等)は、我々の結果でも真皮樹状細胞ではみられず、妥当と考えた。3. ランゲルハンス細胞、真皮樹状細胞で発現の異なった遺伝子のreal-time PCRを行ってマイグロアレイの結果を確認し、従来知られていなかった複数の遺伝子を同定し、新治験を得た。

1. CD34-positive cells derived from umbilical cord blood in cultured human umbilical cord cells and dermal dendritic cells were induced to differentiate in serum-free culture with X-VIVOI5, M-CSF, TNF-a, Flt-3 ligand, stem cell factor, TGF-β1 and in cultured human umbilical cord blood cells with the same phenotype. The peripheral blood cells from healthy individuals were induced by GM-CSF and IL-4 in culture. 2. The method for gene analysis of DNA in cells and dermal dendritic cells is described in this paper. Agilent's system has the same intensity of detection as that of dermal dendritic cells. The result of the study is that the dermal dendritic cells are highly developed and properly examined. 3. The results of real-time PCR for the detection of different genes in dermal dendritic cells and dermal dendritic cells were confirmed, and the results of real-time PCR for detection of multiple genes were determined.