ヒト吸収歯根にセメント芽細胞を移入し歯根再生を試みる基礎研究

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本研究の目的は、既に吸収が進行した歯根の新生セメント質による再生である。一旦形成されると骨組織とは異なり代謝活性が低いことが知られるセメント質の再生を、基質合成能の高いセメント芽細胞を局所に移入することにより細胞生物学的に実現させる。臨床応用を見据えた場合、矯正治療に伴う歯根吸収は象牙質に及ぶ比較的大きいものもあり、誘導されるセメント質量が大きくなければならないため、セメント形成能のできるだけ高いセメント芽細胞のクローンを選別し、単離を進めた。移入を計画しているヒトセメント芽細胞は既に単離が終了しており、hTRETとBmi-1の遺伝子導入により不死化されている。これらの不死化セメント芽細胞を培養し、アリザリン染色を用いて石灰化能の高い細胞株の選別を進めた。さらに、セメント芽細胞を歯根吸収面に移入するにあたり、移入条件の至適化も重要となるため、ヒト羊膜ヘセメント芽細胞を播種する実験を進めた。セメント芽細胞をヒト抜去歯の歯根吸収面に移入する際、ヒト羊膜にセメント芽細胞を播種させて歯根を被覆する。本実験では、セメント芽細胞が歯根吸収面に定着し、セメント質が再生するまでの期間、細胞のスカッフォールドとしての機能を羊膜に期待している。まず、一卵膜分のヒト羊膜を入手し、絨毛膜の除去を行い、歯根被覆に適切な大きさを検討している。現在羊膜シートの上でセメント芽細胞を培養し、播種する条件を検討している。およそ1週間羊膜上でセメント芽細胞を培養すると、羊膜表面はアリザリン染色に濃染を示す石灰化能の高い環境となることがわかっており今年度は歯根表面に人工的に吸収窩を作成してセメント芽細胞を移入する手技条件を検討した。今後はサンプルを免疫不全マウスSCID miceの背部皮下に移植するin vivoの実験に移行していく計画である。