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口蓋裂発生の機序解析の新展開-口蓋突起癒合時の上皮索基底膜の動態からの検討-

腭裂发育机制分析新进展——从腭突融合过程中上皮索基底膜的动力学考察——

基本信息

批准号：
20659314
负责人：
菅原利夫
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Aichi Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

[目的]プロテオグリカンは細胞表面や細胞外基質に存在し、ヘパラン硫酸(HS)などの糖鎖やコアタンパク質を介してさまざまな分子と相互作用をし、細胞活性を制御する重要な働きを担っている。本研究では、実験1:口蓋突起癒合期における上皮索基底膜の断裂と口蓋形成のメカニズムを明らかにするため,実験2:口蓋形成期の口蓋骨および上顎骨形成へのHSとその分解酵素ヘパラナーゼの関与を明らかにするために、パールカンならびにヘパラナーゼの局在性を免疫組織化学的に検討した。[材料と方法]ラミニンとパールカンの二重染色による蛍光顕微鏡観察、および、osterix、osteopontin、およびヘパラン硫酸、ヘパラナーゼを免疫染色し、光顕、蛍光顕微鏡にて観察した。[結果と考察]実験1口蓋突起癒合期には,上皮索基底膜においてパールカンおよびコラーゲンIVの消失が観察された.口蓋突起上皮細胞が分泌したヘパラナーゼはパールカンのへパラン硫酸鎖に抱合されている増殖因子を遊離・活性化することにより間葉系細胞の分化・増殖を惹起する可能性が推測された.また、口蓋突起上皮細胞が分泌したMMP (matrix metalloproteinase)はコラーゲンIV分子を細分化することで,上皮索基底膜の分解に関与することが示唆された.実験2口蓋突起癒合後に口蓋骨形成予定域に細胞の集積を認め、骨形成は生後0日に観察された。osterixは骨表層の骨芽細胞のみに、osteopontinは骨梁表層に認められた。形成された骨基質の一部にHS局在が観察された一方で、ヘパラナーゼは骨表層の骨芽細胞に認められた。これらのことより、口蓋骨形成は口蓋突起癒合後に開始すること、さらに、骨形成過程において骨芽細胞が産生したヘパラナーゼにより骨基質中に存在するヘパラン硫酸に抱合されている増殖因子を遊離・活性化させ、硬口蓋形成に与る可能性が推察された。

[Objective] Prostaglandin plays an important role in controlling cell activity by mediating sugar chains and carbohydrates such as perylene sulfate (HS) that exist on the cell surface and extracellular matrix, and by interacting with molecules and molecules. The present study includes: 1. The fracture of the epithelial chordal basement membrane and the development of the flap during the healing period of the flap process; 2. The enzyme decomposition of the flap during the development of the flap bone and the formation of the maxilla. [Materials and Methods] Double staining, microscopy, sterex, osteopontin, sulfuric acid, immunostaining, microscopy, microscopy [Results] 1. During the healing period of the flap, the disappearance of the epithelial chordal basement membrane was observed. The possibility of differentiation and proliferation of mesenchymal cells is speculated. MMP (matrix metalloproteinase) is secreted by epithelial cells of the flap and is involved in the breakdown of the basement membrane of the epithelial cord. 2. After flap process healing, flap bone formation is localized, cell accumulation is recognized, bone formation is observed 0 days after birth. Osteopontin and osteopontin are the most important factors affecting the growth of osteoblasts. A part of the bone matrix was formed and the bone bud cells on the surface of the bone were identified. The possibility of free activation of growth factors and hard flap formation during bone formation was explored.