新規グルココルチコイド耐性遺伝子GSTM1のアポトーシス抑制機構の解明

新型糖皮质激素抗性基因GSTM1的凋亡抑制机制的阐明

• 批准号: 20890089
• 负责人: 細野 奈穂子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20890089/
• 关键词: 薬剤反応性; シグナル伝達; GSTM1

平成21年度に申請者は、GSTM1を強発現させた白血病細胞株を用い、GSTM1がBcl3・NF-κB(p50)の活性化を介し、グルココルチコイド(GC)によるアポトーシスを抑制機構の解明に取り組んだ。GSTM1によるBcl3・NF-κB(p50)の活性化で転写が促進される遺伝子を過去の情報をもとに定量PCR法を用いて解析し、GCアポトーシスと関連が深い遺伝子の抽出をおこなった。GSTM1を強発現させた細胞では、細胞周期調節因子であるcyclin D1の発現亢進を認めた。このcyclin D1の発現はGC添加前の構成的活性化を示しており、NF-κB(p50)の構成的活性化を反映しているものと考えられた。しかし、GC添加後の遺伝子発現変化では、GSTM1発現細胞と比較細胞との間でほぼ同様のkineticsを示したことから、Bcl3・NF-κB(p50)/cyclin D1の経路は、GCのシグナル経路とは直接的には関与していない可能性が示唆された。また、その他GCによるアポトーシス経路としての関与が予想されたMcl1,Puma,Bcl2などの遺伝子群は比較細胞との間に発現の差異はみられなかった。RNA干渉実験によるGSTM1の発現抑制系を用いて、cyclin D1の発現とBcl3・NF-κB(p50)の関与を検討したが、electroporation法によるRNA干渉の持続時間が72時間という短時間の間においては、NF-κB(p50)の構成的活性化の低下までには至らず、cyclin D1との関連が証明できなかった。GCによるアポトーシス経路におけるBcl3・NF-κB(p50)/cyclin D1の関与に関しては、BCL3の強発現系を作製し現在検討中である。

The applicant for the 21st year of Heisei submitted a proposal for the development of leukemia cell lines, the activation of Bcl3 NF-κB(p50) by GSTM 1, and the identification of mechanisms for inhibiting GSTM1 activity. The activation of Bcl-3 NF-κB(p50) in GSTM-1 was promoted by quantitative PCR, which was used to analyze and extract the gene. GSTM1 is strongly expressed in cells and cell cycle regulators. Cyclin D1 is strongly expressed. The activation of cyclin D1 and NF-κB(p50) components before GC addition were also investigated. GSTM1 gene expression changes after GC addition, GSTM1 gene expression changes, GSTM1 gene expression changes The differences between the two groups of cells were compared, and the differences between the two groups of cells were compared. The expression inhibition of GSTM1 in RNA stem cells was studied by using the method of electroporation. The expression of cyclin D1 and Bcl3·NF-κB(p50) were correlated. The duration of RNA stem cells was 72 minutes. The activation of cyclin D1 and NF-κB(p50) was reduced. The relationship between BCL-3, NF-κB(p50)/cyclin D1 and GC-3 protein expression is under discussion.