エメリー・ドレイフス型筋ジストロフィーにおけるリン酸化ラミンの意義

磷酸化核纤层蛋白在金刚砂肌营养不良症中的意义

• 批准号: 21591104
• 负责人: 三橋 弘明
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: National Center of Neurology and Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21591104/
• 关键词: 病理学; タンパク質; 筋ジストロフィー; ラミンA; C; リン酸化; 早期診断; 核膜

A型ラミンは細胞の核膜に存在しフィラメントを形成する細胞骨格タンパク質である。他の核膜タンパク質群と結合して核の形状を支持するほか、DNAや転写因子とも相互作用し遺伝子発現の制御にも関わっている。A型ラミン遺伝子(LMNA)の変異はエメリー・ドレイフス型筋ジストロフィー(AD-EDMD)の原因となる。A型ラミンタンパク質には30ヶ所以上のリン酸化部位が存在しており、リン酸化状態がタンパク質の機能を調節することが予想されるが、疾患との関連は明らかでなかった。我々は本研究においてAD-EDMD患者の骨格筋でA型ラミンのSer458が特異的にリン酸化されていること、リン酸化酵素Akt1がA型ラミンSer458をリン酸化することを見出した(Mitsuhashi et al. J Cell Sci,2010)。そこで今年度はマウス筋芽細胞株C2C12への遺伝子導入、およびAD-EDMD患者由来繊維芽細胞を用い、A型ラミンリン酸化の亢進が核に与える影響を解析した。野生型、変異型A型ラミンとAkt1をC2C12細胞に発現させた結果、A型ラミンの局在および核の形状はリン酸化を亢進させた場合も正常と変わらなかった。また、ラミンと結合し核膜を支持するタンパク質、LAP2beta,nesprin,emerin,SUN1/2の局在を免疫染色法によって検討したが、A型ラミンのリン酸化亢進によってこれらの核膜タンパク質の局在が変化することはなかった。次に、DNAとの相互作用への影響を調べるため、患者由来繊維芽細胞をヘテロクロマチンマーカーであるH3K27me3,H3K9me3,H4K20me3の抗体を用いて解析したが、リン酸化の亢進とヘテロクロマチンの分布に関連性は見られなかった。一方、患者由来細胞にはA型ラミンの核内fociが多く見られ、そこに筋分化に重要な役割を果たす転写因子が共局在する様子が観察された。

Type A cells exist in the nuclear membrane and form a cellular skeleton. The binding of the nuclear membrane to the nuclear shape supports the formation of DNA, the interaction of DNA and the formation of DNA. The reasons for the variation of LMNA in AD-EDMD A type of acid is present in the upper part of the body, so the acid state of the body is regulated by the function of the body. In this study, we demonstrated that Ser458 is A specific enzyme for A-type protein in the skeletal muscle of AD-EDMD patients (Mitsuhashi et al. J Cell Sci,2010). This year, we analyzed the effects of gene transfer and A-type acidification on the proliferation of C2C12 cells in AD-EDMD patients. Wild type, variant A type, Akt1, C2C12 cells, A type, and A type are present in the cell cycle. In addition, the nuclear membrane support system of LAP2beta,nesprin,emerin,SUN1/2 is used for immunostaining, and the nuclear membrane support system of LAP2beta, nesprin,emerin,SUN1/2 is used for immunostaining. H3K27me3,H3K9me3,H4K20me3 antibody analysis, DNA interaction, and distribution. A patient's origin cell A type of nuclear foci is found in many cells, and the important function of tendon differentiation is found in many cells.

项目成果

Autophagic degradation of nuclear component in nuclear envelopathy

核膜病中核成分的自噬降解

• 发表时间: 2009
• 作者: Park YE;Hayashi YK;Bonne G;Arimura T;他
• 通讯作者: 他

核膜およびサルコメアタンパク質関連筋疾患の病態解明と治療法の開発についての研究

核膜和肌节蛋白相关肌肉疾病发病机制及治疗进展的研究

• 发表时间: 2010
• 作者: Karasawa T;Takahashi A;Saito R;Sekiya M;Igarashi M;Iwasaki H;Miyahara S;Koyasu S;Nakagawa Y;IshiiK;Matsuzaka T;Kobayashi K;Yahagi N;Takekoshi K;Sone H;Yatoh S;Suzuki H;Yamada N;Shimano H;林由起子
• 通讯作者: 林由起子

A new antibody specifically recognizes muscles from laminopathy patients

一种新抗体可以特异性识别椎板病患者的肌肉

• 发表时间: 2009
• 作者: Mitsuhashi H;Hayashi YK;Noguchi S;Nishino I
• 通讯作者: Nishino I

Filamin C is required for the maintenance of sarcomere structure in medaka

维持青鳉肌节结构需要细丝蛋白 C

• 发表时间: 2010
• 作者: Tomita M;Tomita Y;Unekawa M;Toriumi H;Suzuki N;三橋弘明
• 通讯作者: 三橋弘明

Specific phosphorylation of Ser458 of A-type lamins in LMNA-associated myopathy patients

• DOI: 10.1242/jcs.072157
• 发表时间: 2010-11-15
• 期刊: JOURNAL OF CELL SCIENCE
• 影响因子: 4
• 作者: Mitsuhashi, Hiroaki;Hayashi, Yukiko K.;Nishino, Ichizo
• 通讯作者: Nishino, Ichizo