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蛍光蛋白トランスジェニックマウスを利用した神経新生関連遺伝子の同定

使用荧光蛋白转基因小鼠鉴定神经发生相关基因

基本信息

批准号：
21650077
负责人：
神吉浩明
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21650077/
关键词：
脳・神経神経科学再生医学発現制御

项目摘要

(1)神経幹・前駆細胞のマーカーとして広く利用されているNestinの遺伝子の制御領域(プロモーター+エンハンサー)でオレンジ色蛍光蛋白Kusabira-Orange(KOr)の産生をドライブするトランスジェニック(Tg)マウス(nestin/KOr)と(2)幼弱神経細胞で活性化されるdoublecortin(DCX)遺伝子の発現制御領域で緑色蛍光蛋白EGFPの産生をコントロールするTgマウス(DCX-EGFP)とをかけ合わせ、ダブルTg(第一世代『ColorTimer』)マウスを作出した。このマウスの脳から(1)KOr(+)/EGFP(-)である神経幹・前駆細胞の集団、及び(2)KOr(-)/EGFP(+)である幼弱神経細胞の集団をソーティングにより分取し、それぞれの集団の遺伝子発現プロファイルをDNAマイクロアレイ解析により精査した。得られたデータから、神経分化に伴い発現量が大きく増加あるいは減少する遺伝子のリストを作成した。今後は、それらのリストの上部にある各遺伝子についてin vitro及びin vivoで強制発現及び発現抑制を行い、それらの遺伝子の産物の神経分化における生理学的機能の解明を試みる。このマウスはまた、米Johns Hopkins大学との共同研究において神経幹・前駆細胞及び幼弱神経細胞それぞれが高濃縮された細胞集団を調製するために用いられ、その成果は平成23年4月発行のNature誌(Ishizuka et al.DISC1-depndent switch from progenitor proliferation to migration in the developing cortex.2011.Nature Apr 6)に掲載された。

(1)Nestin's gene control domain ((nestin/KOR) and (2) green fluorescent protein EGFP production in the control field of activation of doublecortin(DCX) gene in young neurons. (1)KOr(+)/EGFP (-),(2)KOr(-)/EGFP(+),(3) KOR(+)/EGFP (+),(4) KOR(+)/EGFP(+),(5)KOR(+)/EGFP (+),(6) KOR (+)/EGFP (+),(7) KOR (+)/EGFP (+),(8) KOR (+)/EGFP (+),(9),(10) KOR (+)/EGFP (+),(+),(9) KOR (+),(9),(9) The amount of light emitted by the brain is increased, and the amount of light emitted by the brain is decreased. In the future, we will try to clarify the physiological function of stress generation and inhibition in vitro and vivo in the upper part of the gene. The results of the joint research conducted by Johns Hopkins University on the regulation of highly concentrated neuronal cells were described in Nature et al. DISC1-depent switch from progenitor proliferation to migration in the developing cortex.