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魚類補体におけるC3アイソタイプの機能分化とC3多重化が感染防御に果たす役割

C3同种型功能分化和C3复用在鱼类补体防御感染中的作用

基本信息

批准号：
09J03793
负责人：
一木智子
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

補体系は宿主生体防御機構のひとつで、非自己細胞の認識、異物細胞の破壊、感染部位への白血球の誘引、貪食作用の促進、B細胞の活性化など多様な生体防御機能を担う。約30種の液性タンパクと膜型タンパクから構成され、その中でもC3は上記生理活性の多くを媒介する多機能性生体防御因子である。魚類補体系の特徴は中心成分C3が遺伝子重複により多重化し、通常の「His 型 C3」に加えて「Non-His 型 C3」を持つことである。本研究は、2種の異なるC3アイソタイプのコイ生体防御機構における役割をタンパク質レベルで解明し、魚に最適な予防医学の確立に貢献することを目的としている。コイでは、His 型 C3-H1と Non-His 型 C3-Sが血清中の主要なアイソタイプとして存在し、これまでの研究で2つのC3アイソタイプが様々な標的異物に対して異なる結合スペクトルを示すことが明らかになった。また、大変興味深いことに、2種のC3アイソタイプは、コイ血清中で複合体を形成していることが示唆された。これまで、どの生物種からもC3同士の複合体は報告されていなかったため、今年度は新奇C3複合体の同定とその生体防御機能の解明に注力した。その結果、(i)C3複合体はコイの生理的条件下において血清から分離でき分子量約440kDaの2量体を形成していること、(ii)複合体の形成に二価イオンを要求しないこと、(iii)精製したC3-H1とC3-Sから複合体を再構築できること、(iv)C3複合体中に未活性化型C3-H1が含まれていることが明らかになった。これらの結果から、コイC3複合体はこれまで報告されているC5転換酵素の様な複合体とは全く組成が異なることが示唆された。さらに、再構築したC3複合体がC3完全除去血清の溶解活性を回復できたことから、この複合体が溶解反応に関与することが示唆された。新奇C3複合体のさらなる機能の解明は、魚類補体系におけるC3多重化の意義を解明する重要な糸口となると考えられる。

The host biological defense mechanism of the system is sensitive, non-cellular knowledge, biological cell breakage, induction of white blood cells in the infected site, promotion of feeding effect, B-cell activation and multi-biological defense mechanism. About 30% of the liquids were isolated from the membrane, and the physiological activity was detected on the C3, and the multi-functional biological defense factor was detected in the medium. The central component of the classification system is C3. The central component of the system is multiple, usually "His type C3" plus "Non-His type C3". In this study, two days later, the health defense mechanism was used to make sure that the health care system was used to explain the disease, and that the most important thing was to make sure that the preventive medicine system was established. The serum samples of C3-H1, His, Non-His, C3murS were found to be present, and the results of the study of C3 were detected in combination with the results of the study. The complex was formed in the serum of the patients with a deep taste, a deep taste, a deep smell, 2-inch C3, This year's novel C3 complex is the same as the biological defense mechanism. the biological defense mechanism can be explained by the biological defense mechanism. The results were as follows: (I) under the physiological conditions of the C3 complex, the molecular weight of the C3 complex was about 2 body weight (440kDa), the molecular weight of the C3 complex was about 2 body weight, the molecular weight of the (ii) complex was higher than that of the control, (iii) the C3-H1 of the C3 complex was not required, and the molecular weight of the C3 complex was higher than that of the control group. (iv) the inactive C3-H1 in C3 complex contains inactive DNA. The results of the experiment, the report of the C3 complex, the enzyme of the C5 enzyme, the enzyme of the complex, the complete assembly of the complex, the report, report and report. The serum lysozyme C3 was completely removed, and the serum lysolytic activity was completely removed. The serum lysate activity was completely removed. The novel C3 complex is able to understand the meaning of C3 multiplicity in the system.