魚類免疫学実験モデルとしてのGFPトランスジェニッククローンギンブナの作製

GFP转基因克隆Ginbuna的创建作为鱼类免疫学实验模型

基本信息

  • 批准号:
    17658092
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.98万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2005
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2005 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.GFP発現トランスジェニックギンブナ系統の確立1)EF-1プロモーターにEGFP遺伝子を連結したコンストラクトとI-Scelメガヌクレアーゼを共に胚に注入し、育成したギンブナが現在193尾得られている。鰭や筋肉等に蛍光が認められるが、成熟までにまだ少し時間を要する。今後、卵における蛍光の発現を観察することにより、F1個体におけるEGFP遺伝子の伝達を確認する予定である。2)メダカトランスポゾン(Tol2)トランスポゼースmRNA及びTol2配列の一部にEF-1αプロモーターとGFP遺伝子配列を組み込んだコンストラクトを同時にゼブラフィッシュ受精卵に注入したところ、I-Scelメガヌクレアーゼ法等に比べ高いGFPの発現および次世代への伝達が認められた。そこで、ギンブナ受精卵を用いて検討した結果、29個体中18個体(62%)で蛍光が観察され,強い発現を示す個体が2個体(7%)、中程度が7個体(24%)、弱い発現を示す個体が9個体(31%)認められた。現在、次世代への伝達について検討中である。2.細胞障害性Tリンパ球特異的GFP発現トランスジェニック魚の確立1)ゼブラフィッシュを用いて、フグCD8p+GFPを導入したF0個体を150尾作製した。これまでに、F0とAB系統魚を掛け合わせたF1を作製しPCR法により検討する方法を用いて56個体のスクリーニングを終えているが、遺伝子が導入されたF0個体は見つかっていない。現在もスクリーニングを継続中である。2)CD8トランスジェニックゼブラフィッシュの作製と並行して、トランスジェニック魚の解析・評価手法を確立するために、個体発生に伴う内因性CD8αおよびCD8β遺伝子の発現時期及び部位についてRT-PCR法により検討した。その結果、CD8αは受精後2日目、CD8βは1日目より発現がみられ、いずれも胸腺において最も強い発現が認められ28日目以降発現が増強した。
1. Establishment of GFP Expression System 1)EF-1 EGFP Expression System 2) EF Expression System 1) EGFP Expression System 1)EF Expression System 1)EF Expression System 1) EGFP Expression System 1) EF Expression System 1) EGFP Expression System 1) EGFP Expression System 1) EF Expression System 1) EGFP Expression System 1) EF Expression System 1) EGFP Expression System 1 Fins, muscles, etc., need time to mature. In the future, the occurrence of EGFP gene will be observed and confirmed in F1 individuals. 2) A part of the EF-1 alpha gene and Tol-2 gene sequence is composed of the EF-1 alpha gene and GFP gene sequence, and the I-Scel gene is injected into the fertilized egg at the same time. The results showed that 18 out of 29 individuals (62%) were detected, 2 individuals (7%) were detected strongly, 7 individuals (24%) were detected moderately, and 9 individuals (31%) were detected weakly. Now, the next generation is coming. 2. The expression of CD8p +GFP in F0 individuals was determined by PCR. F0 and AB system fish are linked to F1 and PCR method is used to detect 56 individuals. Now you're in the middle of something. 2) CD8 α and CD8 β genes were detected by RT-PCR method during individual development. CD8 α and CD8 β were detected on day 2 and day 1 after fertilization, respectively.

项目成果

期刊论文数量(23)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
ギンブナPerforin遺伝子におけるアイソタイプの構造及び発現解析
Gingbuna穿孔素基因的同种型结构及表达分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    杣本智軌;占部慎二;鮫島史朗;中西照幸;中尾実樹;小西麻理子・荒木亨介・瀧澤文雄・乙竹充・森友忠昭・中西照幸
  • 通讯作者:
    小西麻理子・荒木亨介・瀧澤文雄・乙竹充・森友忠昭・中西照幸
Expression profiles of TCRβ and CD8α mRNA correlate with virus-specific cell-mediated cytotoxic activity in ginbuna crucian carp
  • DOI:
    10.1016/j.virol.2006.01.019
  • 发表时间:
    2006-05
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.7
  • 作者:
    T. Somamoto;Y. Yoshiura;Atsushi Sato;M. Nakao;T. Nakanishi;N. Okamoto;M. Ototake
  • 通讯作者:
    T. Somamoto;Y. Yoshiura;Atsushi Sato;M. Nakao;T. Nakanishi;N. Okamoto;M. Ototake
ゼブラフィッシュ腎臓におけるside population(SP)細胞の同定と局在
斑马鱼肾脏侧群(SP)细胞的鉴定和定位
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    小林功;森友忠昭;荒木亨介;瀧澤文雄;中西照幸
  • 通讯作者:
    中西照幸
Cytotoxic activities of fish leucocytes
  • DOI:
    10.1016/j.fsi.2005.03.013
  • 发表时间:
    2006-02-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4.7
  • 作者:
    Fischer, U;Utke, K;Nakanishi, T
  • 通讯作者:
    Nakanishi, T
Characterization and localization of side population (SP) cells in zebrafish kidney hematopoietic tissue
  • DOI:
    10.1182/blood-2007-08-104299
  • 发表时间:
    2008-02-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    20.3
  • 作者:
    Kobayashi, Isao;Saito, Kazuyuki;Nakanishi, Teruyuki
  • 通讯作者:
    Nakanishi, Teruyuki
{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

中西 照幸其他文献

イルス感染で誘導されたギンブナ細胞傷害T 細胞と単球の細胞傷害活性
病毒感染诱导的 Gimbuna 细胞毒性 T 细胞和单核细胞的细胞毒活性
  • DOI:
  • 发表时间:
    2010
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    杣本 智軌;中西 照幸;中尾 実樹
  • 通讯作者:
    中尾 実樹
魚類白血球の細胞傷害に関与するセリンプロテアーゼの精製とその特性解析
参与鱼类白细胞细胞毒性的丝氨酸蛋白酶的纯化和表征
  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    松浦 雄太;藪 健史;宮澤 龍一郎;司馬 肇;中西 照幸
  • 通讯作者:
    中西 照幸
ニジマス食細胞NADPHオキシダーゼの特徴-p67phoxスプライシングバリアントの解析
虹鳟吞噬细胞NADPH氧化酶的特征-p67phox剪接变体的分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    村田 学博;世良田 研;眞弓 雅行;瀧澤 文雄;大谷 真紀;森友 忠昭;中西 照幸
  • 通讯作者:
    中西 照幸
IFNγ投与によるギンブナ好中球の活性化について
IFNγ给药激活银杏中性粒细胞
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中嶋 城治;柴崎 康宏;松浦 雄太;難波 亜紀;間野 伸宏;中西 照幸
  • 通讯作者:
    中西 照幸

中西 照幸的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('中西 照幸', 18)}}的其他基金

魚類における組み換えサイトカインを用いた細胞性免疫の誘導
使用重组细胞因子诱导鱼类细胞免疫
  • 批准号:
    15F15398
  • 财政年份:
    2015
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
Th1 Th2 バランスの制御による魚類のウイルス病に対する細胞性免疫誘導
通过控制 Th1 Th2 平衡诱导鱼类针对病毒性疾病的细胞免疫
  • 批准号:
    09F09118
  • 财政年份:
    2009
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows

相似海外基金

Novel screening system expressing human metabolic enzymes in vivo
体内表达人类代谢酶的新型筛选系统
  • 批准号:
    20K06416
  • 财政年份:
    2020
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
ゼブラフィッシュにおける簡便な遺伝子破壊法の開発と脳機能解析への展開
斑马鱼简单基因破坏方法的开发及其在脑功能分析中的应用
  • 批准号:
    19K16196
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
恒常性破綻から形態再生に至る組織再生プロセスの統合的理解を目指して
旨在全面了解从稳态破坏到形态再生的组织再生过程
  • 批准号:
    19H03232
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Cell lineages during zebrafish fin regeneration
斑马鱼鳍再生过程中的细胞谱系
  • 批准号:
    16K07365
  • 财政年份:
    2016
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
ゼブラフィッシュ比較動物学とビーズ技術を用いたサリドマイド催奇性メカニズムの解明
利用斑马鱼比较动物学和珠技术阐明沙利度胺致畸机制
  • 批准号:
    15H04288
  • 财政年份:
    2015
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Development of a new method for satiotemporal gene function by the CRISPR/Cas9 system
利用 CRISPR/Cas9 系统开发时空基因功能新方法
  • 批准号:
    26870845
  • 财政年份:
    2014
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
Study of cell interacting mechanism during fish tissue regeneration
鱼类组织再生过程中细胞相互作用机制的研究
  • 批准号:
    24570233
  • 财政年份:
    2012
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Evolution of visual opsin gene expression through gene duplication manifested in fish and primates
鱼类和灵长类动物中通过基因复制实现视觉视蛋白基因表达的进化
  • 批准号:
    23657164
  • 财政年份:
    2011
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
Overexpression of myogenic regulatory factors driven by heat shock promoters in medaka and its developmental study.
热激启动子驱动的青鳉生肌调节因子的过度表达及其发育研究
  • 批准号:
    22700428
  • 财政年份:
    2010
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
トランスジェニックゼブラフィッシュを用いた造血幹細胞の動態解析
使用转基因斑马鱼进行造血干细胞的动态分析
  • 批准号:
    10J02549
  • 财政年份:
    2010
  • 资助金额:
    $ 1.98万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了