Notch小胞輸送制御因子の探索による膜タンパク質局在化機構の解明

通过寻找Notch囊泡转运调节因子阐明膜蛋白定位机制

• 批准号: 09J05081
• 负责人: 青山 尚規
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo University of Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J05081/
• 关键词: ショウジョウバエ; Notch情報伝達系; 小胞輸送; RNA干渉法; ESCRT複合体; エンドサイトーシス; Notch 情報伝達系

Notch情報伝達系の受容体であるNotchは、線虫からヒトまで進化的に広く保存されており、極めて多くの細胞の運命決定に関与しています。また、白血病や癌などの原因として、Notch情報伝達系の異常が報告されています。近年、Notch情報伝達系を制御する重要な要素として小胞輸送が注目されており、その分子機構が徐々に明らかになってきています。本研究は、Notch小胞輸送の分子機構を解明することを目的としています。私はこれまで、ショウジョウバエ生体内において、約5000遺伝子に対するRNA干渉(RNAi)を行い、Notch情報伝達系に異常が見られる遺伝子を網羅的に探索しました。その結果、有望な26遺伝子を同定しました。このうち8遺伝子の機能喪失型突然変異を作出し、Notchの細胞内輸送とNotch情報伝達に機能する遺伝子としてvps2を同定しました。酵母における研究から、Vps2はESCRT-III複合体の構成因子であり、エンドサイトーシスの過程において、multivesicular bodyの形成に機能していることが示唆されています。本年度、ショウジョウバエvps2機能喪失型突然変異体を用いて、Notch情報伝達系におけるvps2遺伝子の機能解析を行いました。vps2突然変異ホモ接合体胚では、高温状態においてNotchの異常な細胞内分布と末梢神経の増加が観察されました。神経細胞の増加は、Notch情報伝達系が低下した場合の特徴的な表現型です。このことから、胚発生時期において、Vps2は高温状況下におけるNotch情報伝達の活性化に必要であることが示唆されました。また、幼虫の翅成虫原基において、vps2遺伝子のコンディショナルノックアウトを行うと、Notchの細胞内分布が異常になり、Notch情報伝達活性の指標であるvestigial boundary enhancer LacZレポーターの発現が増加しました。このことから、Vps2は翅成虫原基においてNotch情報伝達を抑制することが示唆されました。

Notch intelligence 伝 reach is の from let body で あ る Notch は, nematodes か ら ヒ ト ま で evolutionary に hiroo く save さ れ て お り, extremely め て more く の cells の destiny decided に masato and し て い ま す. ま た や cancer, leukemia な ど の reason と し て, Notch intelligence 伝 is の exception が report さ れ て い ま す. In recent years, Notch intelligence 伝 da を suppression す る is key factor な と し て vesicular transport が attention さ れ て お り, そ の molecular institutions が xu 々 に Ming ら か に な っ て き て い ま す. In this study, the <s:1> molecular mechanism of ます and Notch cell delivery を is explained to clarify the する とを とを とを objective of と て て ます ます ます ます. Private は こ れ ま で, シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ born in vivo に お い て, about 5000 but 伝 に す seaborne dry involved る RNA (RNAi) line を い, Notch intelligence 伝 department に exception が see ら れ る posthumous son 伝 を snare に explore し ま し た. The そ そ result is expected to be the same as the 伝 offspring を of the な26. こ の う ち 8 heritage type 伝 function の lost son suddenly - different を し, Notch の intracellular delivery と Notch intelligence 伝 da に function す る posthumous son 伝 と し て vps2 を with fixed し ま し た. Yeast に お け る research か ら, Vps2 は ESCRT - III complex の constitute factor で あ り, エ ン ド サ イ ト ー シ ス の process に お い て, multivesicular body の form に function し て い る こ と が in stopping さ れ て い ま す. This year, シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ type function vps2 lost suddenly - variant を with い て, Notch intelligence 伝 da に お け る vps2 posthumous son 伝 の line function analytical を い ま し た. Vps2 suddenly - different ホ モ gametes embryo で は, high temperature state に お い て Notch の abnormal distribution と な cell endings god 経 の raised plus が 観 examine さ れ ま し た. The な phenotype です of <s:1> characteristics in the case of が low <s:1> た in neurotic cells with <s:1> increased and Notch information 伝 to が. こ の こ と か ら period, embryo 発 に お い て, Vps2 は under high temperature conditions に お け る Notch intelligence 伝 da の activeness に necessary で あ る こ と が in stopping さ れ ま し た. ま た, adult larvae の wing primordium に お い て, vps2 but 伝 の コ ン デ ィ シ ョ ナ ル ノ ッ ク ア ウ ト を line う と, Notch の intracellular distribution が abnormal に な の り, Notch intelligence 伝 activity index で あ る vestigial boundary enhancer LacZレポ レポ タ タ タ が が increase ま た た. こ の こ と か ら, Vps2 は wing adult primordium に お い て Notch intelligence 伝 da を inhibit す る こ と が in stopping さ れ ま し た.

项目成果

es of vps2 in trafficking and activation of the Notch receptor in Drosoph

vps2 在 Drosoph 中 Notch 受体的运输和激活中的作用

• 发表时间: 2011
• 作者: Yamazaki;et al.;James Giordano(ed.);中村周史;青山尚規
• 通讯作者: 青山尚規

A genome-wide RNAi screen to identify the genes regulating vesicular trafficking of Notch in Drosophila melanogaster

全基因组 RNAi 筛选，鉴定调节果蝇 Notch 囊泡运输的基因

• 发表时间: 2009
• 作者: Naoki Aoyama;Ikuo Tamura;Koyama Keita;Ryu Ueda;Yuki Yamaguchi-Takei;Akira Watanabe;Yusuke Kitada;Tetsuya Tabata;Kenji Matsuno
• 通讯作者: Kenji Matsuno

Notch deficiency implicated in the pathogenesis of congenital disorder of glycosylation IIc

• DOI: 10.1073/pnas.0504115102
• 发表时间: 2005-12-20
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Ishikawa, HO;Higashi, S;Matsuno, K
• 通讯作者: Matsuno, K