光操作技術の開発による植物胚発生におけるヒストンH3バリアントの機能解析

通过开发光操纵技术对植物胚胎发育中的组蛋白 H3 变体进行功能分析

• 批准号: 09J05807
• 负责人: 栗原 大輔
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J05807/
• 关键词: ヒストンH3バリアント; 光操作; 植物胚発生

本研究では時期特異的,細胞特異的にタンパク質機能阻害また誘導する技術の開発によって,シロイヌナズナ胚発生過程における細胞個性獲得および分裂パターンへのヒストンH3バリアント交換の寄与を解明することを目指したが,平成22年度はヒストンH3バリアントのシロイヌナズナ胚における発現パダーンの解析,発現誘導のためのヒートショックプロモーターの条件検討,また胚発生イメージングを行った.ヒストンH3バリアントを含む13種類のHTRについて,GFPを融合したタンパク質を発現する形質転換植物体の胚を観察したところ,球状胚までの発現に大きな違いは見られなかったが,球状胚の時期からはメリステムでの発現の違いが見られたり,維管束で強い発現が見られたりと,HTRのプロモーターによって発現時期・場所に変化が見られた.このことは,シロイヌナズナ胚において,ヒストンH3バリアントの発現の違いにより遺伝子発現・機能の違いを持つことが示唆された.続いて,ヒートショックプロモーター:ヒストンH2B-GFPを発現する形質転換植物体を用いて,ステージインキュベーターにより,顕微鏡下で培養液中の単離胚珠を37℃処理したところ,約90分後からGFP蛍光が観察され始めた.次に,レーザーによる細胞特異的発現誘導を行うために.根において488nmレーザーを4分間照射したところ,24時間後観察するとGFPの蛍光が検出された.その後,根の伸長も観察できたことより,細胞へのダメージは少ないと考えられた.また,初期胚発生過程の解析において分裂過程を観察するために,初期胚において核に蛍光タンパク質が発現する形質転換植物体を用いて,単離胚珠においてライブイメージングを行ったところ,受精卵および1細胞期胚において,胚および胚柄が分裂する様子が観察された.これらのように本研究では,植物胚発生におけるヒストンH3バリアントの機能解析のためのイメージング技術・光操作技術の基盤を構築できた.

During the special period of this study, the special telephone machine can prevent the operation of the technology, the birth process, the cell sex, the cleavage, the H3, the delivery, the In the year of Pingcheng 22, there are no significant differences between H3 and Pingcheng. in Pingcheng, there is a good understanding of the situation in Pingcheng in the year 22. This is true in H3, which contains the same type of HTR. GFP fusion is used to detect the growth of plants, the globular embryos show that the plants are full-blown, the globular embryos are full of heavy metals, the globular embryos are in the first place, and the globular embryos are in the same period as the globular embryos. HTR will be responsible for the registration of the current market. If you don't know what's going on, you're going to need to know that you're not going to have a chance to do so. In the culture solution, the ovule was isolated from the ovule at 37 ℃, and the ovule was isolated from the ovule at 37 ℃. After about 90 minutes, GFP light was used to observe the temperature. For the second time, you should pay attention to the current situation of the special cell. The root 488nm is irradiated in 4 minutes, and the GFP light is detected after 24 hours. After that, the root lengthens to see if there are any problems, and the cells do not need to pay more attention. In the early stage, the process of embryo division was analyzed, the process of division was observed, and the shape of the plant was observed in the early stage, the ovule was isolated from the ovule, the embryo was isolated from the ovule, and the embryo of the fertilized egg was aborted at the cellular stage. In the course of this study, plant embryos are used in this study. H3 plant embryos can be analyzed in terms of basic optical operation techniques.

项目成果

細胞分裂におけるハスピンキナーゼの解析

细胞分裂过程中haspin激酶的分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 栗原大輔;松永幸大;大村知広;東山哲也;福井希一
• 通讯作者: 福井希一

シロイヌナズナの細胞分裂に関わるヒストンH3スレオニンキナーゼの解析

拟南芥细胞分裂中组蛋白H3苏氨酸激酶的分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 栗原大輔;松永幸大;大村知広;東山哲也;福井希一
• 通讯作者: 福井希一

染色体動態を制御するオーロラキナーゼの機能解析

控制染色体动力学的极光激酶的功能分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 栗原大輔;松永幸大;池田虎三;内山進;福井希一
• 通讯作者: 福井希一

染色体動態-染色体の動き,動物と植物の共通点と違い

染色体动力学-染色体的运动、动物和植物之间的共性和差异

• 发表时间: 2009
• 期刊: 生物の科学遺伝 63
• 作者: 栗原大輔;松永幸大
• 通讯作者: 松永幸大

分裂期キナーセが制御する染色体動態からみた細胞分裂の研究

从有丝分裂激酶控制的染色体动力学角度研究细胞分裂

• 发表时间: 2010
• 作者: Ozeki Johji;et al.;Satoshi Satoh;石川一也;Hara S;佐藤訓志;栗原大輔
• 通讯作者: 栗原大輔