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iPS細胞誘導法を応用した造血幹細胞の新たな誘導増幅法の確立

应用iPS细胞诱导法建立造血干细胞新诱导扩增方法

基本信息

批准号：
09J06018
负责人：
岡部基人
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J06018/
关键词：
造血幹細胞 iPS細胞遺伝子導入リプログラミング

项目摘要

申請者は前年度にマイクロアレイデータを解析し、造血幹細胞にて特異的に発現する遺伝子を30種類ほど候補遺伝子として抽出した。これらの遺伝子についてレトロウイルスベクターを作成し、フローサイトメーターを用いて分取した造血前駆細胞に遺伝子導入を行い造血幹細胞の誘導を試みた。まず、候補遺伝子群を造血前駆細胞に多重感染させたのちマウスに移植を行った後末梢血を採取し造血前駆細胞由来の細胞が生着しているかを解析した。その結果、マーカー遺伝子導入群においては末梢血中にドナー由来の細胞を確認することができなかったのに対し、候補遺伝子導入群では末梢血中にドナー由来の細胞が確認できた。また、移植マウス骨髄中の造血幹細胞画分を解析したところ、候補遺伝子遺入群においてのみドナー由来の細胞が確認できた。この結果は、造血前駆細胞から造血幹細胞が誘導されたことを示唆するものであった。この時得られたドナー由来造血幹細胞画分の細胞をPCR法にて導入遺伝子解析したところ、4つの候補遺伝子の導入が確認された。そこで、4つの候補遺伝子群を複数の組み合わせにて造血前駆細胞に遺伝子導入を行い、同様に移植を行った結果、特定の遺伝子の導入によって長期的な造血の維持、ドナー由来造血幹細胞の誘導を確認できた。現在は長期的な経過観察中であるが、結果の再現性は得られている。これまでに、ES細胞以外からの造血幹細胞は成功しておらず、本知見は、分化細胞から造血幹細胞を誘導し得る方法の確立に大きな可能性を残す結果と言え、世界的に見ても非常に価値の高いと考えられる。また、研究は現在のところ大きな問題は生じておらず、順調に遂行できていると思われる。

The applicant analyzed the results of the previous year's analysis, and the hematopoietic stem cells' specific hematopoietic stem cells were extracted in 30 types.これらの缝子についてレトロウイルスベクターを成し、フローサイトメータThe pre-hematopoietic cells were separated and introduced into the hematopoietic stem cells to induce hematopoietic stem cells. Multiple infection of prehematopoietic prehematopoietic cells and candidate for transplantation The origin of hematopoietic pre-hematopoietic cells and the origin of pre-hematopoietic cells are collected and analyzed.そのResults, マーカー弝子 introduced into the group においては in the peripheral blood にドナー origin のcells をconfirmation することができなかったのに対し、Candidates were introduced into the peripheral blood of the groupではにドナーorigin cellsがconfirmationできた.また、The hematopoietic stem cells in the transplanted bone marrow are analyzed and analyzed, and the candidates are included in the group and the origin of the cells is confirmed.このRESULTS は、Hematopoietic pre-cells からHematopoietic stem cells が inducing されたことをshows instigation するものであった.この时得られたドナーderived hematopoietic stem cell classification のPCR method にて introduction 伝子analysed したところ, 4つの candidate 缝子の Importがconfirmationされた.そこで, 4つの candidate addendum 伝子群をpluralの集团み合わせにて Prehematopoietic cells に秆子 introducing を行い、 Same 様にtransplantation を行The result, the introduction of specific genetic material, the long-term maintenance of hematopoiesis, and the confirmation of the induction of hematopoietic stem cells derived from it. Now we have been observing the results for a long time, and the reproducibility of the results has been achieved.これまでに、Hematopoietic stem cells other than ES cells はしておらず、Original knowledge は、Differentiated cells からHematopoietic stem cells をinducing The method of guiding and establishing the possibility is great, the result is incomplete, and the world is very clear.また、Research はNow のところ大きなproblem は生じておらず、Shuntiao にexecution できていると思われる.