形質細胞様樹状細胞株 PMDC05 を用いた樹状細胞の発生・分化機構の解明

使用浆细胞样树突状细胞系 PMDC05 阐明树突状细胞发育和分化的机制

• 批准号: 09J07002
• 负责人: 渡部 紀宏
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J07002/
• 关键词: 形質細胞様樹状細胞; 骨髄系樹状細胞; 抗原提示; 腫瘍特異的細胞傷害性T細胞; WT1; 細胞株; 形質転換; 腫瘍抗原

平成22年度は以下の研究を実施した。○ PMDC05を抗原提示細胞として用いた、腫瘍特異的細胞傷害性T細胞(CTL)の誘導体外で増幅させた腫瘍特異的CTLを体内へ戻す養子免疫療法は、正常細胞を害することなく、腫瘍抗原を有する腫瘍細胞のみを攻撃することから、期待される治療法の一つである。しかしながら、腫瘍特異的CTLの増幅・維持に必要な抗原提示細胞を、一定の質で大量に、しかも継続的に用意することは困難である。PMDC05はHLA-A2、HLA-A24陽性であり、かつ、強力な抗原提示能を有することから、人工的抗原提示細胞としての応用の可能性が考えられた。PMDC05は、無刺激時においても強力な抗原提示能を有しているが、その抗原提示能を増強させるために、我々はLPSにょって刺激を行った。PMDC05をLPSで刺激することにより、(1)樹状突起の形成、(2)抗原提示分子の発現増強、(3)IL-12p70,TNF-□産生の増強、(4)同種リンパ球に対する抗原提示能の顕著な増強、が認められた。これらの結果から、腫瘍特具的CTL誘導には、LPS-stimulated PMDC05を抗原提示細胞として用いた。LPS-stimulated PMDC05に、白血病関連抗原であるWT1のペプチドをパルスした後、正常人家梢血から回収したCD8陽性T細胞と共培養することによって、フローサイトメトリーにおいて、WT1テトラマー陽性細胞、すなわち、WT1ペプチドを認識する細胞が確認された。また、腫瘍抗原ではなく、ウイルス抗原として、サイトメガロウイルスのペプチド(CMVpp65)をPMDC05にパルスすることによって、CMVpp65テトラマー陽性細胞が検出された。以上の結果から、腫瘍やウイルス感染の為の養子免疫療法において、抗原援示細胞としてPMDC05は有用であると考えられる。これらの研究成果は、Leukemia Researchに投稿、掲載された(Leuk Res.20211 Jan 7.[Epub ahead of print])。

Heisei 22 years of research and implementation of the following PMDC05 antigen prompts cell activation, tumor-specific cytotoxic T cells (CTL) induction, in vitro amplification, tumor-specific CTL induction, in vivo immunotherapy, normal cell activation, tumor-specific antigen activation, tumor-specific cytotoxic T cells (CTL) attack, and expectant therapy. It is difficult to understand the purpose of increasing and maintaining tumor-specific CTLs because antigens are necessary to prompt cells to produce a large number of cells with a certain quality. PMDC05 is HLA-A2, HLA-A24 positive, strong antigen prompt can be used, artificial antigen prompt cells can be used. PMDC05 is a strong antigen indicator in the absence of stimulation. PMDC05 stimulated by LPS,(1) dendrimer formation,(2) increased expression of antigen cue molecules,(3) increased production of IL-12p70 and TNF-α,(4) increased expression of antigen cue molecules in allogeneic protein, and (5) increased expression of antigen-signaling molecules. The results showed that the tumor specific CTL induced by LPS-stimulated PMDC05 antigen could be used in the treatment of tumor. LPS-stimulated PMDC05 cells, leukemia-associated antigen WT1 positive cells, normal human blood, CD8 positive T cells, and co-cultured WT1 positive cells were identified. The positive cells were detected in PMDC05 when the tumor antigen was detected. The results showed that PMDC05 was useful for immunotherapy. The results of this study were published in Leukemia Research (Leukk Res.20211 Jan 7. [Epub ahead of print])。

项目成果

Apoptosis of leukemic cells by using tRNase Z^L under the direction of oncogene-targeting small guide RNA.

在靶向癌基因的小引导 RNA 的指导下，使用 tRNase Z^L 使白血病细胞凋亡。

• 发表时间: 2010
• 作者: Masuya;H.;小川みふゆ;山浦悠一;山浦悠一;山浦悠一;A.Niedzwiecki;宮川雄大;宮川雄大;宮川雄大;Akie Yamahira;Norihiro Watanabe;Norihiro Watanabe;Norihiro Watanabe
• 通讯作者: Norihiro Watanabe

Transformation of dendritic cells from plasmacytoid to myeloid in a leukemic plasmacytoid dendritic cell line (PMDC05)

• DOI: 10.1016/j.leukres.2010.03.002
• 发表时间: 2010-11-01
• 期刊: LEUKEMIA RESEARCH
• 影响因子: 2.7
• 作者: Watanabe, Norihiro;Narita, Miwako;Takahashi, Masuhiro
• 通讯作者: Takahashi, Masuhiro

Generation of antigen-specific cytotoxic T lymphocytes using a leukemic plasmacytoid dendritic cell line as antigen presenting cells

• DOI: 10.1016/j.leukres.2010.12.003
• 发表时间: 2011-06-01
• 期刊: LEUKEMIA RESEARCH
• 影响因子: 2.7
• 作者: Yamahira, Akie;Narita, Miwako;Takahashi, Masuhiro
• 通讯作者: Takahashi, Masuhiro

Induction of antigen specific cytotoxic T cells by using leukemic plasmacytoid dendritic cell line(PMDC05)as artificial antigen presenting cells

使用白血病浆细胞样树突状细胞系（PMDC05）作为人工抗原呈递细胞诱导抗原特异性细胞毒性T细胞

• 发表时间: 2009
• 作者: Masuya;H.;小川みふゆ;山浦悠一;山浦悠一;山浦悠一;A.Niedzwiecki;宮川雄大;宮川雄大;宮川雄大;Akie Yamahira;Norihiro Watanabe;Norihiro Watanabe;Norihiro Watanabe;Norihiro Watanabe;Akie Yamahira;渡部紀宏
• 通讯作者: 渡部紀宏

Anti-leukemic cytotoxicity of oncogene-targeting small guide RNA.

靶向癌基因的小引导 RNA 的抗白血病细胞毒性。

• 发表时间: 2010
• 作者: Masuya;H.;小川みふゆ;山浦悠一;山浦悠一;山浦悠一;A.Niedzwiecki;宮川雄大;宮川雄大;宮川雄大;Akie Yamahira;Norihiro Watanabe;Norihiro Watanabe;Norihiro Watanabe;Norihiro Watanabe
• 通讯作者: Norihiro Watanabe