メダカTol1トランスポゾンの線虫C．elegans発生研究への応用

青鳉 Tol1 转座子线虫 C.

• 批准号: 09J07188
• 负责人: 児玉 健
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J07188/
• 关键词: トランスポゾン; 形質転換; 線虫; Toll

本研究では最近開発された新規脊椎動物トランスポゾン実験系であるメダカTol1を線虫C.elegansに応用することを目指しており、当面の目標はTol1が挿入された線虫系統の作成である。前年度はBombardment法を用いた形質転換系統作成とTol1トランスポゼースのコドン最適化を行ったが、いずれも期待したようなTol1トランスポゼース高発現につながらず、当初の予想よりもTol1の転移頻度が低いらしいことがわかった。そこで、生殖系列細胞で恒常的に高発現する遺伝子、pie-1のプロモーター領域、3'UTR領域を用い、complex array作製法により生殖系列細胞での恒常的Tol1トランスポゼース高発現系統の作製を試みた。pie-1のプロモーター領域、3'UTR領域を用いてpie-1p :: transposase :: pie-1 3' UTRを作製した。pie-1p :: transposase :: pie-1 3' UTR、pie-1p :: GFP :: pie-1 3' UTR、C.elegansゲノムDNAそれぞれを制限酵素切断して線状化した後、混合して生殖巣にマイクロインジェクションした。形質転換系統中でGFPを発現しているものをスクリーニングしたが、GFPを発現する系統は得られなかった。生殖細胞におけるTol1挿入頻度が現状では極めて低いと考えられ、本研究の成功には生殖系列細胞でのTol1転移率を飛躍的に高める方途を探る必要があると思われる。

This study で は recently opened 発 さ れ た new rules of vertebrate ト ラ ン ス ポ ゾ ン be 験 department で あ る メ ダ カ Tol1 を worm c. elegans に 応 with す る こ と を refers し て お り, face-to-face の target は Tol1 が scions into さ れ の た nematodes system made で あ る. Before the annual は を Bombardment method with い た form quality planning in the system make と Tol1 ト ラ ン ス ポ ゼ ー ス の コ ド ン line optimization を っ た が, い ず れ も expect し た よ う な Tol1 ト ラ ン ス ポ ゼ ー ス high 発 now に つ な が ら の to ず, thinking よ り も Tol1 の planning moving low frequency が い ら し い こ と が わ か っ た. そ こ で series, reproductive cells で constant high に 発 now す る heritage 伝, pie - 1 の プ ロ モ ー タ ー field, 3 'UTR field を い, complex array method for に よ り series of reproductive cells で の constant Tol1 ト ラ ン ス ポ ゼ ー ス を try the high 発 now system の cropping み た. Pie - 1 の プ ロ モ ー タ ー areas, 3 'UTR field を with い て pie - 1 p: : transposase: : pie - 1 3' UTR を cropping し た. pie-1p :: transposase :: pie-1 3’utr, pie-1p :: GFP :: Pie - 1 3 'UTR, c. elegans ゲ ノ ム DNA そ れ ぞ れ limitations を enzyme cut し て linear change し た after, mixed し て reproductive 巣 に マ イ ク ロ イ ン ジ ェ ク シ ョ ン し た. Change form quality planning system of で GFP を 発 now し て い る も の を ス ク リ ー ニ ン グ し た が, GFP を 発 now す る system was は ら れ な か っ た. Germ cell に お け る Tol1 scions into frequency が status quo で は め extremely low て い と exam え ら れ, this study の success に は series of reproductive cells で の Tol1 planning move rate を leap high に め る party way を agent る necessary が あ る と think わ れ る.

项目成果

Netrin/UNC-6 signal regulates epidermal morphogenesis in C.elegans.

Netrin/UNC-6 信号调节线虫表皮形态发生。

• 发表时间: 2010
• 作者: Kodama;et al.
• 通讯作者: et al.

The Toll element of medaka fish, a member of the hAT transposable element family, jumps in Caenorhabditis elegans.

青鳉鱼的 Toll 元件是 hAT 转座元件家族的一员，在秀丽隐杆线虫中跳跃。

• 发表时间: 2009
• 作者: 諸隈智貴;ら;児玉健
• 通讯作者: 児玉健