HCVの新規生活環再現システムの開発とそれを用いた抗HCV剤の評価・探索

新型HCV生命周期繁殖系统的开发及其抗HCV药物的评价与探索

• 批准号: 09J08756
• 负责人: 森 京子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J08756/
• 关键词: C型肝炎ウイルス(HCV); 急性肝炎由来AH1株; ヒト肝癌細胞株Li23; HCV生活環; HuH-7細胞; HCVの生活環; JFH-1; アッセイシステム; 新しいHCV-RNA複製システム; リバビリン; 抗HCV剤; ヒト肝癌細胞株Li23細胞; レプリコン; 作用メカニズム; IMPDH

当該年度は、2つの大きな成果をあげ、本研究の最終目標を達成することができた。1つ目は、急性肝炎患者由来AH1株(遺伝子型1b)の全長HCVRNAの上流にレポーター遺伝子であるレニラルシフェラーゼを組み込むことにより、簡便に薬剤アッセイができるシステム(AH1R)の構築に成功した。このアッセイシステムを国際誌(Virus Genes)に投稿して、受理された(Mori K et al.,Virus Genes,2012)。AH1RとOR6(遺伝子型1bHCV-0株由来のアッセイシステム)を用いて、IFN-α、IFN-γおよびサイクロスポリンAの薬剤感受性を比較したところ、AH1株由来の全長HCVRNA複製システム(AH1細胞)とHCV-0株由来の全長HCVRNA複製システム(0細胞)を比較した以前の結果と同じ結果を示したことから、これらの薬剤に対する感受性の違いは、ウイルス側の要因で決まっていることが示唆された。2つ目の成果は、本研究の最終目標であった「新しいLi23細胞を用いた、HCV生活環の再現システムの構築」を達成したことである。治癒細胞であるORL8cを用いて、感染性粒子産生系JFH-1(遺伝子型2a)の感染が認められ、さらに、ORL8cから産生されたJFH-1粒子がさらにORL8cに感染性を示すことを見出した。この結果により、既存のHuH-7細胞と異なる新しいLi23細胞におけるHCV生活環が完成したことになる。HCV生活環の再現システムを2種類の細胞で構築したことは、「HCVの感染経路の研究」および「HCVに関連する宿主因子の研究」などに広く応用でき、HCV研究においてとても意義のある成果である。

When the year is over, the final goal of this study will be achieved. 1. Construction of full-length HCV RNA upstream from AH1 strain (genotype 1b) isolated from patients with acute hepatitis was successful. This article was submitted to and accepted by Virus Genes (Mori K et al., Virus Genes,2012)。AH1RとOR6 Comparison of the susceptibility of HCV RNA replication system (AH1 cells) derived from genotype 1bHCV-0 strain to IFN-α, IFN-γ and HCV RNA replication system (AH1 cells) derived from genotype 1bHCV-0 strain to HCV RNA replication system (AH1 cells) The main reason for this is that it is difficult to find a solution to the problem. 2. The final goal of this study is to achieve the goal of "new use of Li23 cells and reconstruction of HCV life cycle". Cured cells were identified by ORL 8c and infectious particles were produced by JFH-1(genotype 2a). As a result, existing HuH-7 cells and new Li-23 cells were completed. HCV life cycle reproduction system 2 kinds of cell construction,"HCV infection pathway research" and "HCV related host factors research", the use of information, HCV research in the middle of the meaning of the results.

项目成果

Identification of a host factor determining the anti-HCV activity of ribavirin

确定利巴韦林抗 HCV 活性的宿主因子的鉴定

• 发表时间: 2011
• 作者: 高吉慎太郎;佐藤正寛;Mori Kyoko
• 通讯作者: Mori Kyoko

Li23 cell-derived HCV-RNA replicating systems enabling analysis for anti-HCV mechanism of Ribavirin

Li23 细胞衍生的 HCV-RNA 复制系统可用于分析利巴韦林的抗 HCV 机制

• 发表时间: 2009
• 作者: Masayuki IKEDA;Hironobu Sakuma;Ryuji Tada;Mori Kyoko;Shintaro Takayoshi;Masanori Ikeda;上田優輝;森京子
• 通讯作者: 森京子

Oncostatin M synergistically inhibits HCV RNA replication in combination with interferon-alpha

制瘤素 M 与干扰素-α 结合可协同抑制 HCV RNA 复制

• 发表时间: 2009
• 期刊: FEBS Letters 2583
• 作者: Shintaro Takayoshi;Masahiro Sato;Ikeda Masahiko
• 通讯作者: Ikeda Masahiko

Replicons from genotype 1b HCV-positive sera exhibit diverse sensitivities to anti-HCV reagents

• DOI: 10.1016/j.antiviral.2009.01.007
• 发表时间: 2009-04-01
• 期刊: ANTIVIRAL RESEARCH
• 影响因子: 7.6
• 作者: Nishimura, Go;Ikeda, Masanori;Kato, Nobuyuki
• 通讯作者: Kato, Nobuyuki

Oxidative stress induces anti‐hepatitis C virus status via the activation of extracellular signal‐regulated kinase

• DOI: 10.1002/hep.23026
• 发表时间: 2009-09
• 期刊: Hepatology
• 影响因子: 13.5
• 作者: M. Yano;M. Ikeda;K. Abe;Yoshinari Kawai;Misao Kuroki;Kyoko Mori;H. Dansako;Y. Ariumi;S. Ohkoshi;Y. Aoyagi;N. Kato