HCVの新規生活環再現システムの開発とそれを用いた抗HCV剤の評価・探索

新型HCV生命周期繁殖系统的开发及其抗HCV药物的评价与探索

基本信息

批准号：
09J08756
负责人：
森京子
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

当該年度は、2つの大きな成果をあげ、本研究の最終目標を達成することができた。1つ目は、急性肝炎患者由来AH1株(遺伝子型1b)の全長HCVRNAの上流にレポーター遺伝子であるレニラルシフェラーゼを組み込むことにより、簡便に薬剤アッセイができるシステム(AH1R)の構築に成功した。このアッセイシステムを国際誌(Virus Genes)に投稿して、受理された(Mori K et al.,Virus Genes,2012)。AH1RとOR6(遺伝子型1bHCV-0株由来のアッセイシステム)を用いて、IFN-α、IFN-γおよびサイクロスポリンAの薬剤感受性を比較したところ、AH1株由来の全長HCVRNA複製システム(AH1細胞)とHCV-0株由来の全長HCVRNA複製システム(0細胞)を比較した以前の結果と同じ結果を示したことから、これらの薬剤に対する感受性の違いは、ウイルス側の要因で決まっていることが示唆された。2つ目の成果は、本研究の最終目標であった「新しいLi23細胞を用いた、HCV生活環の再現システムの構築」を達成したことである。治癒細胞であるORL8cを用いて、感染性粒子産生系JFH-1(遺伝子型2a)の感染が認められ、さらに、ORL8cから産生されたJFH-1粒子がさらにORL8cに感染性を示すことを見出した。この結果により、既存のHuH-7細胞と異なる新しいLi23細胞におけるHCV生活環が完成したことになる。HCV生活環の再現システムを2種類の細胞で構築したことは、「HCVの感染経路の研究」および「HCVに関連する宿主因子の研究」などに広く応用でき、HCV研究においてとても意義のある成果である。

今年，我们取得了两个主要结果，并实现了这项研究的最终目标。首先，我们成功构建了一个系统（AH1R），该系统通过将AH1菌株（基因型1B）全长HCVRNA上游的报告基因肾上腺素酶（基因型1B）上游纳入急性肝炎患者的上游。该测定系统已提交给国际期刊（病毒基因），并被接受（Mori K等，病毒基因，2012年）。使用AH1R和OR6（从基因型1BHCV-0菌株中得出的IFN-α，IFN-γ和环孢菌素A的药物易感性）显示出与先前比较全长HCVRNA复制系统的结果相同的结果对这些药物的敏感性取决于病毒方面的因素。第二个结果是实现了这项研究的最终目标，“建立了使用新的LI23细胞重现HCV生命周期的系统”。观察到使用ORL8C，一种治愈性细胞，具有传染性颗粒产生系统JFH-1（基因型2A）的感染，发现从ORL8C产生的JFH-1颗粒在ORL8C中进一步感染。该结果完成了与现有HUH-7细胞不同的新LI23细胞中HCV生命周期。使用两种细胞重现HCV生命周期的系统的构建可以广泛应用于“研究HCV的感染途径”和“研究与HCV相关的宿主因素”，并且在HCV研究中是非常有意义的成就。