RNA結合タンパクのノックダウンによる口腔がん治療のための基礎研究

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H21年度にHuRをノックダウンした細胞のがんに関わる形質を様々な角度から検討した。その結果、HuRをノックダウンした細胞は、1.ARE-mRNAの安定化が阻害されること、2.足場非依存性増殖能、細胞運動能、ならびに浸潤能が抑制されること、3.細胞周期関連タンパクの発現量が低下し、さらにCDK1 mRNAの安定化が阻害されることを明らかにした。これらの研究結果は、Molecular Cancer Research ; 8(4), April, 2010に受理された。これらの研究成果を踏まえて、がんの悪性形質の一つである浸潤活性に対するHuRの影響について詳細に検討した。浸潤能に関わるMMP1遺伝子の転写活性化をluciferase reporter assayで検討し、さらにMMP1の転写因子のmRNAの発現についても確認した。次に、浸潤活性の高い口腔扁平上皮癌(SCC)と浸潤活性の低い口腔疣贅癌(VC)を用いて、HuRを免疫染色し、HuRの局在を検索した。HuRノックダウンにより、1.口腔がん細胞の浸潤能ならびにMMP1遺伝子の転写活性が低下し、同時にMMP1の転写を活性化するAP-1 (c-fos, c-jun)ならびにEts family (ets-1, E1AF)のmRNA量も低下しており、2.免疫染色の結果、VCではHuRが核のみに発現が認められたのに対し、SCCでは核ならびに細胞質に発現が認められ、細胞質のHuR発現亢進が浸潤活性に関与していることが示唆された。1.2.の結果は、口腔がん細胞の浸潤能の亢進はHuRの発現を介しており、HuRノックダウンにより口腔がん細胞の悪性形質を抑制できる可能性を示唆している。これらの結果は、現在Am J Patholに論文投稿中である。