RNA結合タンパクのノックダウンによる口腔がん治療のための基礎研究

通过敲除RNA结合蛋白治疗口腔癌的基础研究

• 批准号: 09J09771
• 负责人: 格口 渉
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J09771/
• 关键词: HuR; AU-rich element; invasion; MMP1; ets; AU-rich melement; anchorage-independent cell growth; cell-cycle related protein; knockdown

H21年度にHuRをノックダウンした細胞のがんに関わる形質を様々な角度から検討した。その結果、HuRをノックダウンした細胞は、1.ARE-mRNAの安定化が阻害されること、2.足場非依存性増殖能、細胞運動能、ならびに浸潤能が抑制されること、3.細胞周期関連タンパクの発現量が低下し、さらにCDK1 mRNAの安定化が阻害されることを明らかにした。これらの研究結果は、Molecular Cancer Research ; 8(4), April, 2010に受理された。これらの研究成果を踏まえて、がんの悪性形質の一つである浸潤活性に対するHuRの影響について詳細に検討した。浸潤能に関わるMMP1遺伝子の転写活性化をluciferase reporter assayで検討し、さらにMMP1の転写因子のmRNAの発現についても確認した。次に、浸潤活性の高い口腔扁平上皮癌(SCC)と浸潤活性の低い口腔疣贅癌(VC)を用いて、HuRを免疫染色し、HuRの局在を検索した。HuRノックダウンにより、1.口腔がん細胞の浸潤能ならびにMMP1遺伝子の転写活性が低下し、同時にMMP1の転写を活性化するAP-1 (c-fos, c-jun)ならびにEts family (ets-1, E1AF)のmRNA量も低下しており、2.免疫染色の結果、VCではHuRが核のみに発現が認められたのに対し、SCCでは核ならびに細胞質に発現が認められ、細胞質のHuR発現亢進が浸潤活性に関与していることが示唆された。1.2.の結果は、口腔がん細胞の浸潤能の亢進はHuRの発現を介しており、HuRノックダウンにより口腔がん細胞の悪性形質を抑制できる可能性を示唆している。これらの結果は、現在Am J Patholに論文投稿中である。

In H21, HuR is the most important factor in the development of cell culture. The results were as follows: 1. Inhibition of ARE-mRNA stabilization; 2. Inhibition of field-independent proliferation, cell motility, and infiltration; 3. Reduction of cell cycle-related protein expression; and 3. Inhibition of CDK1 mRNA stabilization. Molecular Cancer Research ; 8(4), April, 2010. The results of this research are discussed in detail in terms of the nature of the substance and the influence of the infiltration activity on the HuR. Infiltration is associated with the activation of MMP1 gene in the luciferase reporter assay, and the expression of MMP1 gene in the mRNA is confirmed. Next, high invasive activity in squamous cell carcinoma (SCC) and low invasive activity in verrucous carcinoma (VC) were detected by immunostaining, HuR and HuR. 1. Infiltration of oral cells and MMP-1 gene activity decreased, while MMP-1 gene activity increased AP-1 (c-fos, c-jun) mRNA levels of Ets family (ets-1, E1AF) were significantly lower than those of control group.(2) Immunostaining results showed that VC was associated with the development of HuR in the nucleus and SCC was associated with the development of HuR in the cytoplasm and increased infiltration activity in the cytoplasm. 1.2. The results indicate the possibility that the infiltration of oral cells may be increased and the expression of HuR may be inhibited.これらの结果は、现在Am J Patholに论文投稿中である。

项目成果

RNA結合タンパクHuRのノックダウンが口腔がんに及ぼす影響

RNA结合蛋白HuR敲低对口腔癌的影响

• 发表时间: 2009
• 作者: 柴田哲男;則竹瞬;Andrej Matsnev;柴田哲男;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;格口渉;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;格口渉
• 通讯作者: 格口渉

Relevance of RNA binding protein HuR to invasion activity of oral cancer cells

RNA结合蛋白HuR与口腔癌细胞侵袭活性的相关性

• 发表时间: 2010
• 作者: 柴田哲男;則竹瞬;Andrej Matsnev;柴田哲男;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi
• 通讯作者: Wataru Kakuguchi

HuR is exported to the cytoplasm in oral cancer cells in a different manner from that of normal cells.

• DOI: 10.1038/sj.bjc.6605084
• 发表时间: 2009-06-16
• 期刊: British journal of cancer
• 影响因子: 8.8

HuR Knockdown Changes the Oncogenic Potential of Oral Cancer Cells

• DOI: 10.1158/1541-7786.mcr-09-0367
• 发表时间: 2010-04-01
• 期刊: MOLECULAR CANCER RESEARCH
• 影响因子: 5.2
• 作者: Kakuguchi, Wataru;Kitamura, Tetsuya;Higashino, Fumihiro
• 通讯作者: Higashino, Fumihiro

RNA結合タンパクHuRのノックダウンは口腔がんの増殖能や浸潤能を低下させる

RNA结合蛋白HuR的敲低降低了口腔癌的生长和侵袭能力

• 发表时间: 2010
• 作者: 柴田哲男;則竹瞬;Andrej Matsnev;柴田哲男;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;Wataru Kakuguchi;則竹瞬;格口渉
• 通讯作者: 格口渉