インフルエンザウイルスと細菌重複感染による重症肺炎マウスモデルにおける宿主側重症化因子の同定と制御

流感病毒与细菌合并感染重症肺炎小鼠模型宿主加重因素的鉴定与控制

• 批准号: 09J56521
• 负责人: 小佐井 康介
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J56521/
• 关键词: インフルエンザウイルス; 肺炎球菌; 重複感染; アポトーシス; カスパーゼ; クローニング; 重症肺炎; 急性肺傷害

インフルエンザ肺炎に代表される急性肺障害(ALI/ARDS)では、気道上皮および免疫細胞のアポトーシスの病態への関与が指摘されている.インフルエンザウイルス感染症においてもアポトーシス関連酵素(カスパーゼなど)が活性化されることが報告されており,インフルエンザウイルスと肺炎球菌を重複感染させた重症肺炎モデルでは特に活性化していることが予想される.我々はこの重複感染マウスモデルの摘出肺からRNAを抽出し,cDNAライブラリーを作成した後,酵母を用いたカスパーゼの活性化因子の同定システムを用いて、caspase-8,7を活性化する因分のスクリーニングを行った.その結果,既知の分子ではあるものの,アポトーシスに重要な因子であるFas, FADD, caspase-2, caspase-3, caspase-7, caspase-8などの分子がクローニングされた.これらのin vivoでの活性を確認するため,上記重複感染マウスとそれぞれの単独感染マウスの肺を用いて,カスパーゼの発現量や活性の測定,TUNEL法によるアポトーシス細胞の検出などを行った.その結果,インフルエンザウイルス,肺炎球菌それぞれの単独感染において,時間経過とともに,effector caspaseの一つであるcaspase-3や,その上流に位置する外因性のinisiator caspaseであるcaspase-8の開裂,活性化と,TUNEL陽性細胞の増加を認めた.更に重複感染マウスでは,単独感染と比較し肺炎球菌感染後早期にこれらの因子の強い発現,活性化が認められ,インフルエンザ関連細菌性肺炎の重症化にアポトーシス関連因子の強い発現が関与していることが示唆された.現在,病態との関連性,治療のターゲットとなりうるか等検討するため,各種カスパーゼ阻害剤を用いて更に検討を行っており,siRNA,アンタゴニスト抗体などを使用し,詳細な検討を行う予定としている.現時点では本研究と同様の実験は報告されておらず,今後のインフルェンザ関連重症細菌性肺炎や類似する致死性の重症肺炎の病態解析や治療の進歩に本研究が大いに貢献するものと考えられる.

Infantile pneumonia represents acute lung injury (ALI/ARDS) and is related to the pathological problems of airway epithelium and immune cells. The activity of the enzyme associated with pneumonia is reported in the case of severe pneumonia, which is caused by repeated infection with pneumococcus. After the RNA was extracted and cDNA fragments were created, yeast cells were activated by caspase-8 and caspase-7 in response to repeated infection. As a result, known molecules are identified as Fas, FADD, caspase-2, caspase-3, caspase-7, caspase-8 and other important factors. In vivo, the activity was confirmed, repeated infection was recorded, and the isolated infection was detected by TUNEL method. As a result, pneumococcal infection was isolated during the middle of the day, and the time elapsed,effector caspase activity increased, caspase-3 activity increased, and exogenous initiator caspase activity increased, caspase-8 cleavage and activation increased. In addition, in case of repeated infection, the strong expression and activation of the early stage factors associated with pneumococcal infection are related to the strong expression and activation of the early stage factors associated with severe bacterial pneumonia. Now, pathologies and associations, treatments and other research topics, various types of drug resistance agents, use of siRNA, anti-drug antibodies, detailed research topics, predetermined use. At present, this study is a report on the progress of the study, and the future progress of the pathological analysis and treatment of severe bacterial pneumonia associated with similar fatal pneumonia is a major contribution to the study.

项目成果

蛋白分解酵素阻害剤(FOY)投与によるインフルエンザウイルス感染および重症化抑制の検討

通过施用蛋白酶抑制剂（FOY）研究流感病毒感染和严重程度抑制

• 发表时间: 2009
• 作者: 小佐井康介;関雅文;田中章貴;永告洋介;三原智;高園貴弘;西條知見;今村圭文;栗原慎太郎;宮崎泰可;泉川公一;掛屋弘;山本善裕;柳原克紀;田代隆良;河野茂
• 通讯作者: 河野茂

Efficacy of Combination Antifungal Therapy with Intraperitoneally Administered Micafungin and Aerosolized Liposomal Amphotericin B against Murine Invasive Pulmonary Aspergillosis

腹腔给予米卡芬净和雾化脂质体两性霉素 B 联合抗真菌治疗对小鼠侵袭性肺曲霉菌病的疗效

• 发表时间: 2009
• 期刊: Antimicrobial Agents and Chemotherapy 53
• 作者: Takazono T;Izumikawa K;Mihara T;Kosai K;Saijo T;Imamura Y;Miyazaki T;Seki M;Kakeya H;Yamamoto Y;Yanagihara K;Shigeru Kohno
• 通讯作者: Shigeru Kohno

コンパクト内科学(III呼吸器・胸壁・縦隔疾患A感染性呼吸器・胸壁. 縦隔疾患上気道炎, 扁桃炎, 急性気管支炎, 急性細気管支炎)

紧凑内科（Ⅲ 呼吸器官/胸壁/纵隔疾病 传染性呼吸器官/胸壁疾病。纵隔疾病 上呼吸道炎、扁桃体炎、急性支气管炎、急性细支气管炎）

• 发表时间: 2009
• 作者: 小佐井康介;関雅文;河野茂
• 通讯作者: 河野茂

Skn7p Is Involved in Oxidative Stress Response and Virulence of Candida glabrata

• DOI: 10.1007/s11046-009-9233-5
• 发表时间: 2010-02
• 期刊: Mycopathologia
• 影响因子: 5.5
• 作者: Tomomi Saijo;T. Miyazaki;K. Izumikawa;Tomo Mihara;T. Takazono;K. Kosai;Y. Imamura;M. Seki;H. Kakeya;Yoshihiro Yamamoto;K. Yanagihara;S. Kohno