Construction of human antibody library and establishment of selection method to develop fragment antibody therapeutics

人抗体库的构建和片段抗体疗法开发选择方法的建立

• 批准号: 21390032
• 负责人: ITO Yuji
• 金额: $ 9.48万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21390032/
• 关键词: 医薬分子機能学; 抗体; 低分子化抗体; T7ファージ; ファージ提示法; 安定性

In this study, we constructed the libraries of human single-chain Fv antibody and llama VHH antibody using T7 phage display system and established the selection method to isolate the specific phages. Especially, we succeeded in the isolation of the T7 phage clones binding to the antigens from the library, which indicates our library system is useful for a rapid generation of specific antibodies. On the other hand, we found the problematic issues that the non-specific binding phages were enriched by selection process because of folding problems and instability of antibody, which should be solved in the further investigations.

本研究利用T7噬菌体展示系统构建了人源单链抗体和羊驼噬菌体抗体库，并建立了特异性噬菌体的筛选方法。特别是，我们成功地从文库中分离到与抗原结合的T7噬菌体克隆，这表明我们的文库系统对于快速产生特异性抗体是有用的。另一方面，我们发现由于抗体的折叠问题和不稳定性，非特异性结合噬菌体在筛选过程中被富集化的问题，需要在进一步的研究中解决。

项目成果

T7ファージライブラリを用いたヒト抗体結合ペプチドのデザインと評価,第4回生体分子科学シンポジウム

使用T7噬菌体库设计和评估人类抗体结合肽，第四届生物分子科学研讨会

• 发表时间: 2011
• 作者: 入村達郎;岡山博人;清水孝雄監訳;阿部紘平;伊東祐二
• 通讯作者: 伊東祐二

特許出願

专利申请

• 发表时间: 2011

Discovery and Characterization of a Peptide Motif That Specifically Recognizes a Non-native Conformation of Human IgG Induced by Acidic pH Conditions

• DOI: 10.1074/jbc.m807618200
• 发表时间: 2009-04-10
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Sakamoto, Kotaro;Ito, Yuji;Sugimura, Kazuhisa
• 通讯作者: Sugimura, Kazuhisa

ファージライブラリによるヒト抗体結合性ペプチドリガンドの探索と応用

利用噬菌体文库寻找人抗体结合肽配体并应用

• 发表时间: 2011
• 作者: 武内恒成;他;伊東祐二
• 通讯作者: 伊東祐二

A mimotope peptide of Aβ42 fibril-specific antibodies with Aβ42 fibrillation inhibitory activity induces anti-Abeta42 conformer antibody response by a displayed form on an M13 phage in mice

具有 Aβ42 纤维颤动抑制活性的 Aβ42 纤维特异性抗体的模拟表位肽通过在小鼠 M13 噬菌体上展示的形式诱导抗 Abeta42 构象抗体反应

• DOI: 10.1016/j.jneuroim.2011.04.010
• 发表时间: 2011
• 期刊: Journal of neuroimmunology
• 影响因子: 3.3
• 作者: Tanaka;K.;Nishimura;M.;Yamaguchi;Y.;Hashiguchi;S.;Takiguchi;S.;Yamaguchi;M.;Tahara;H.;Gotanda;T.;Abe;R.;Ito;Y.;Sugimura;K.
• 通讯作者: K.