Comparative analysis of reporter gene expression regulated by constitutive promoter for woody plant transformation

木本植物转化组成型启动子调控报告基因表达的比较分析

• 批准号: 21780153
• 负责人: FUKUMOTO Takeshi
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Kagawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21780153/
• 关键词: 樹木; プロトプラスト; プロモーター評価

The transient expression of GFP gene, which regulated by known constitutive promoter in plant, was examined with protoplasts in order to compare the promoter activity in each of protoplast derived from several plant tissues. It was aimed to clarify the efficient promoter in woody plant transformation. For the electroporation study, isolation condition of protoplast was newly clarified in four kinds of mangrove including Avicennia and Sonneratia genus in addition to the previously clarified seven plants. The protoplast of Larix (conifer) showed strong GFP expression by modified 35S (El2Ω) and maize ubiquitin promoter, but not 35S promoter. El2Ω promoter were also available for Bruguiera (mangrove). To compare the promoter activity at the mRNA level, qRT-PCR-based evaluation system was developed, and the plasmid vector for bio-imaging of woody plant was constructed with EL2Ω promoter.

为了比较GFP基因在不同植物组织中的启动子活性，用原生质体检测了GFP基因在植物中的瞬时表达，该基因由已知的植物组成启动子调控。旨在阐明木本植物转化过程中的有效启动子。在电穿孔研究中，除已明确的7种植物外，还对白骨壤属、海桑属等4种红树植物的原生质体分离条件进行了新的澄清。在改良的35S(EL2Ω)和玉米泛素启动子的作用下，落叶松原生质体有较强的绿色荧光蛋白表达，而35S启动子没有表达。红树布鲁氏菌也有EL2Ω启动子。为了在基因水平上比较启动子的活性，建立了基于定量逆转录聚合酶链式反应的评价体系，并用EL2Ω启动子构建了木本植物生物成像的质粒载体。

项目成果

樹木プロトプラストが生産するカロースファイバー形成機構解明:繊維形成部位の微細構造観察‐単一細胞TEM、新規蛍光染色法LCSM、GFP遺伝子導入

阐明树木原生质体产生的胼胝纤维形成机制：纤维形成位点的超微结构观察-单细胞TEM、新荧光染色方法LCSM、GFP基因导入

• 发表时间: 2011
• 作者: 小柳朋也;林徳子;栗田麻未;福元健志;笹本浜子
• 通讯作者: 笹本浜子

マングローブ樹木プロトプラストのアブシジン酸内生量と培養促進・阻害効果

红树原生质体中脱落酸的内源量及培养促进/抑制作用

• 发表时间: 2009
• 作者: 小柳朋也;林徳子;栗田麻未;福元健志;笹本浜子;長谷川愛
• 通讯作者: 長谷川愛