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温度感受性TRPチャネルの活性化メカニズムと構造-機能連関解明

阐明温度敏感TRP通道的激活机制和结构功能关系

基本信息

批准号：
21790221
负责人：
曽我部隆彰
金额：
$ 2.75万
依托单位：
National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21790221/
关键词：
温度感受性チャネル分子進化電気生理学イオンチャネル昆虫

项目摘要

ミツバチからTRPチャネルをクローニングし、温度応答性が示されたAmHsTRPAをヒト胎児腎由来細胞に一過性に発現させて、電気生理学的な機能解析を行った。その結果、このチャネルは34℃が主たる活性化温度閾値であることが示された。また、アリルイソチオシアネート(ワサビ成分)、シンナムアルデヒド(シナモン成分)、カンファー(クスノキ成分)に応答することが分かり、温度刺激と化学刺激では、チャネルに対する阻害剤の効果やチャネルの開口機序が異なることが明らかとなった。このチャネルはミツバチの温度走性に寄与するアンテナに発現が見られ、ミツバチ個体の温度走性や上記化学刺激に対する忌避行動が、AmHsTRPAの阻害剤によって消失することが示された。以上の結果をまとめ、現在論文投稿中である。並行してキョウソヤドリコバチのHsTRPA(NvHsTRPA)をクローニングし、その温度応答性を検討したところ、8℃以下という低温に応答するチャネルであることが分かった。AmHsTRPAやNvHsTRPAは膜翅目(Hymenoptera)特異的に生じたチャネルであり、ショウジョウバエなどの双翅目では見られない。カイコ、コクヌストモドキ、コロモジラミを加えた計6種を対象に、TRPチャネルの進化系統樹解析を行い、先に述べたNvHsTRPAの機能解析の結果と合わせて、BMC Evolutionary Biology誌に投稿し、採択された。上記に加え、低温活性を有するチャネルの解析に適したアフリカツメガエルの卵母細胞発現系を用いた2本差し電流測定系の立ち上げを行った。また、ショウジョウバエの異なる12の近縁種から温度走性行動に重要な役割を果たすTRPA1のクローニングを進めており、その機能差が個体の温度嗜好性にもたらす効果を検討していく予定である。

TRP-induced transient response, temperature response and electrophysiological analysis of fetal kidney derived cells As a result, the activation temperature threshold value of the catalyst is 34℃. In addition, the temperature stimulation, chemical stimulation, and open mechanism of the resistance mechanism of the group are different. The temperature variability of these organisms and the occurrence and disappearance of the protective agent AmHsTRPA in response to chemical stimuli are shown. The above results are in the paper submission. HsTRPA(NvHsTRPA) is a kind of high temperature and low temperature sensor. AmHsTRPA and NvHsTRPA are specific to Hymenoptera. The phylogenetic tree analysis of TRP generation was carried out. The results of functional analysis of NvHsTRPA were described first. The results were submitted to BMC Evolutionary Biology Journal. In addition, the analysis of low temperature activity in oocyte development system was carried out in the middle of the second phase. 12 species of temperature variability in the near future, the effect of temperature variability in TRPA1, the effect of temperature variability in the near future, and the effect of temperature variability in the near future.