自然免疫で働くユビキチン化およびISG化E3リガーゼの機能と生理的意義の解明

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当該年度における研究について以下に示す(<1>～<4>)。<1>(1)ISG化修飾のウイルス感染に対する効果、(2)フリーのISG15およびISG15化修飾の生理的意義について調べるため、ISG15E3リガーゼであるHerc6ノックアウトマウスを使用し、米国渡航先機関において、生体内のフリーのISG15、ISG15化修飾をコントロールできるISG15化関連酵素を組み合わせたダブルノックアウトマウスを作製中である。すでに数種類のダブルノックアウトマウスが完成しており、致死表現型を示すマウスについて解析を進めている。<2>RIG-Iを分解する酵素として報告した(2007,PNAS)ユビキチンE3リガーゼ、RNF125のノックアウトマウスはMEF(mouse embryonic fibroblast)を使用した実験により、RNF125ノックアウトの細胞でウイルス感染後のIFN産生が上昇していることを確認した。現在はリンパ球増殖能についても調べている。<3>また、ウイルス感染後の生体防御に重要なユビキチンE3リガーゼとして報告したTRIM23(2010,PNAS)がNEMOをK27typeでユビキチン化する詳細な証拠、メカニズムを調べている。<4>さらに、ISG15化E1リガーゼUBE1Lのノックアウトマウスと癌亢進の関係に着目しマイクロアレイ解析を行ったところ、EGFRシグナルを増加させる新規癌亢進遺伝子を発見した。この遺伝子を強制発現するとEGFRのリン酸化の上昇が見られ、逆にノックダウンしたところ、EGF刺激後のEGFRリン酸化が著しく減少した。現在はxenograftの実験により、この遺伝子が生体内で癌亢進に働くことを示すとともに、ISG15との関連についても調べている。