Funktion von ISG15 bei viralen Herzmuskelerkrankungen

<s:1> r死亡Bekämpfung病毒感染研究进展与进展。乙型柯萨奇病毒b3 (CVB3)-心肌炎的ⅰ型干扰素促炎性纤维化，促炎性纤维化。研究项目：beschäftigt泛素蛋白蛋白调控蛋白干扰素刺激基因15kda （ISG15）与cvb3型心肌炎和慢性炎症性心肌病相关。研究对象为CVB3型心肌炎的心肌模型（mausmodelell der CVB3- myokartis zeigen），分类为ISG15-System，分类为Kampf gegen CVB3型心肌炎。Eine Verschlechterung der Herzfunktion während der akuten心肌炎与感染相关Mortalität in ISG15-/-和in E1-Aktivierungsenzym Ube1L-/- Mäusen ist auf erhöhte Virustiter in den Herzen dieser Mäuse zurzuf<e:1> hren。1 . Die infizierten Herzen der ISG15-/- and Ube1L-/- Mäuse zeigen im Gegensatz zu wildtype - controlllen echronische Funktionseinschränkung。研究了ISG15的抗病毒作用während der cvb3 - zugunde - liegen。本研究的主要内容是：病毒蛋白während感染底物与isg15 -系统相关。对CVB3 - 2A蛋白酶和CVB3 - 3D RNA聚合酶进行了研究。根据Einsatz verschiedener生物化学方法和Massenspektroskopie mögliche ISG15- substrate innerhalb des CVB3-Proteoms identifiziert werden，在zellculture实验中，Daran anknpfend solen . mit epitop - markekiertem ISG15。在诱变学研究中，研究人员发现了cvb3 -蛋白的通用型和定义型；isg15 -修饰型在蛋白质鉴定中的应用。Darauf - baserend研究了重组噬菌体病毒（virengepr<e:1>）在心肌炎侵染中的作用，并研究了isg15 - zielprotein的修饰及其在心肌炎中的作用。ISG15病毒蛋白与zielzellsola蛋白相互作用的研究进展。Neben dem直接研究了CVB3 ausgelösten核合酶对乙型病毒性心肌炎的酶促作用trägt。In den Herzen CVB3-infizierter ISG15-/- Mäuse waren im Vergleich zum Wildtyp deutlich vermehrt entz<e:1> ndungszellen nachweisbar, wobei Makrophagen dominierten。In diesem forschungsvohaben soll untersucht werden， ob ISG15 auch fgr die Aktivität von Makrophagen In der cvb3 -心肌炎。大足sollen Knochenmarkchimäre aus ISG15-/-， Ube1L-/- und wt Mäusen generiert werden和die cvb3 - myok心炎在糖尿病Chimären非糖尿病werden。Wir werden prfen，研究ISG15-vermittelte prozse在无纺布核肌合酶<s:2> hren können中的作用。[2] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1]

Die angeborene Immunantwort hat für die Bekämpfung von Virusinfektionen eine wichtige Bedeutung. Bei der CoxsackievirusB3 (CVB3)-Myokarditis werden durch Typ I Interferone Prozesse induziert, die zur Verbesserung der Herzfunktion beitragen. Dieses Projekt beschäftigt sich mit der Rolle des Ubiquitin-ähnlichen Proteins Interferon-Stimulated Gene 15 kDa (ISG15) bei der CVB3-Myokarditis und der sich bei suszeptiblen Individuen daraus entwickelnden Inflammatorischen Kardiomyopathie. Unsere Vorarbeiten im Mausmodell der CVB3-Myokarditis zeigen, dass das ISG15-System entscheidend am Kampf gegen CVB3 beteiligt ist. Eine Verschlechterung der Herzfunktion während der akuten Myokarditis sowie eine Infektions-assoziierte Mortalität in ISG15-/- und in E1-Aktivierungsenzym Ube1L-/- Mäusen ist auf erhöhte Virustiter in den Herzen dieser Mäuse zurückzuführen. Die infizierten Herzen der ISG15-/- und Ube1L-/- Mäuse zeigen im Gegensatz zu Wildtyp-Kontrollen eine chronische Funktionseinschränkung. In diesem Forschungsvorhaben sollen molekulare Mechanismen aufgezeigt werden, die dem antiviralen Effekt von ISG15 während der CVB3-Myokarditis zugrunde liegen. Es ist bekannt, dass insbesondere virale Proteine während einer Infektion Substrate des ISG15-Systems sind. Unsere Vordaten deuten auf eine ISGylierung der CVB3 2A Protease und der CVB3 3D RNA Polymerase hin. Daran anknüpfend sollen in Zellkulturexperimenten mit Epitop-markiertem ISG15 unter Einsatz verschiedener biochemischer Methoden und der Massenspektroskopie mögliche ISG15-Substrate innerhalb des CVB3-Proteoms identifiziert werden. In Mutagenese-Studien sollen K-R Konstrukte für einzelne CVB3-Proteine generiert werden und so definierte ISG15-Modifikationsstellen in diesen Proteinen identifiziert werden. Darauf basierend soll mit rekombinanten Viren geprüft werden, ob und wie die ISG15-Modifikation der Zielproteine den Verlauf der viralen Myokarditis beeinflusst. Die Rolle von ISG15 bei der Interaktion zwischen Virusprotein und Zielzelle soll aufgezeigt werden. Neben dem direkten durch CVB3 ausgelösten zytopathischen Effekt auf Kardiomyozyten trägt auch das Einwandern von Immunzellen zur Organfehlfunktion bei der Virusmyokarditis bei. In den Herzen CVB3-infizierter ISG15-/- Mäuse waren im Vergleich zum Wildtyp deutlich vermehrt Entzündungszellen nachweisbar, wobei Makrophagen dominierten. In diesem Forschungsvorhaben soll untersucht werden, ob ISG15 auch für die Aktivität von Makrophagen in der CVB3-Myokarditis wichtig ist. Dazu sollen Knochenmarkchimäre aus ISG15-/-, Ube1L-/- und wt Mäusen generiert werden und die CVB3-Myokarditis in diesen Chimären untersucht werden. Wir werden prüfen, ob ISG15-vermittelte Prozesse in Makrophagen zu verringerten CVB3-Titern in infizierten Kardiomyozyten führen können. Zusammenfassend werden in diesem Forschungsvorhaben Mechanismen untersucht, die zum abgeschwächten Krankheitsverlauf bei der viralen Kardiomyopathie durch Induktion des ISG15-Systems beitragen.