心筋細胞肥大における肥大反応遺伝子の転写調節機構の解明

阐明心肌细胞肥大中肥厚反应基因的转录调控机制

• 批准号: 10J03435
• 负责人: 砂川 陽一
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J03435/
• 关键词: 心肥大; 転写; リプレッサー; p300/GATA4; 心不全; クロマチン; p300; GATA4; NuRD; RbAp48/46; GST-pull downアッセイ

心不全の進行や心筋細胞肥大の進行には心筋特異的転写因子GATA4とHAT(ヒストンアセチルトランスフェラーゼ)活性をもつp300の協調的な作用が重要な役割を担っている。このp300/GATA4経路の更なる制御メカニズムを解明するため、プロテオミクス解析にてGATA4結合タンパクを同定し、その中のNuRD複合体などのリプレッサー複合体の構成蛋白であるRbAp48/46に着目した。本研究では、p300/GATA4経路におけるRbAp48/46の影響を検討することを目的とした。【方法・結果】HEK293Tでの免疫沈降・WB法による解析でRbAp48、RbAp46はどちらもGATA4と直接結合し、p300によって誘導されるGATA4やヒストンのアセチル化、ANFやET-1のプロモーターへのGATA4のDNA結合能やプロモーター活性の亢進はRbAp48、RbAp46の発現によって抑制された。ラット胎児初代培養心筋細胞を用いたレポーターアッセイではRbAp48やRbAp46はフェニレフリン刺激で亢進するANFやET-1のプロモーター活性を抑制した。RbAp48およびRbAp46強制発現させた心筋細胞はフェニレフリン刺激によって誘導されるGATA4のアセチル化や心筋細胞の肥大を有意に抑制した。shRNAにて心筋細胞中のRbAp48/46をノックダウンさせるとGATA4のアセチル化やANFやET-1のプロモーター活性が亢進し、心筋細胞の肥大が誘導された。またフェニレフリン刺激はGATA4とRbAp48およびRbAp46との結合を減少させ、ANFプロモーターのGATAエレメント上からのRbAp48、RbAp46の遊離やRbAp48、RbAp46の核外への移行を誘導した。【結果】RbAp48/46はp300/GATA4経路によって誘導される心筋細胞肥大を抑制した。また、肥大刺激によってRbAp48/46はGATA4から遊離したことから、p300/GATA4と機能的なコンプレックスを形成し、心筋細胞肥大反応を制御していることが示唆された。

The progression of cardiac insufficiency and the progression of myocardial cell hypertrophy are the progression of myocardial insufficiency and the progression of myocardial cell hypertrophy. GATA4 and HAT (ヒストンアThe important role of the coordination of セチルトランスフェラーゼ) active をもつp300 is important.このp300/GATA4経路の正なるcontrolメカニズムを解明するため、プロテオミクスanalytic にてGATA4 combined with タンパクを同定し, その中のNuRD complex などのリプレッサーcomplex constitutive protein であるRbAp48/46に目した. The purpose of this study is to determine the impact of p300/GATA4 on the path of RbAp48/46. [Methods and results] HEK293T immunoprecipitation, WB method analysis, RbAp48, RbAp46 direct binding, p300 induction, GATA4ヒストンのアセチル化, ANFやET-1のプロモーターへのGATA4のDNA binding It can increase the activity of RbAp48 and RbAp46 and suppress the activity of RbAp46. RbAp48 and RbAp are used for the primary culture of myocardial cells. 46 はフェニレフリン stimulates the hyperactivity and suppresses the activity of ANF ET-1 のプロモーター. RbAp48 and RbAp46 are forced to appear and stimulate cardiac muscle cells. It induces the hypertrophy of GATA4 and inhibits the hypertrophy of myocardial cells intentionally. shRNAにてcardiac cellsのRbAp48/46をノックダウンさせるとGATA4のアThe activity of the ANF ET-1 is increased and the hypertrophy of myocardial cells is induced.またフェニレフリンstimulationはGATA4とRbAp48およびRbAp46とのcombinationをreduceさせ、ANFプロモーターのG ATA is used for RbAp48, RbAp46 is free, and RbAp46 is extranuclear and migrates. [Results] The RbAp48/46 and p300/GATA4 pathways induced myocardial cell hypertrophy and inhibited it.また、Hypertrophy stimulationによってRbAp48/46はGATA4から免费したことから、p300/GA TA4's function is to control the formation of muscle cells and the resistance of cardiomyocyte hypertrophy reaction.

项目成果

Retinoblastoma Protein (Rb)-Associated Protein 48 and 46 Form a Functional Complex With p300/GATA4 and Suppress Hypertrophic Responses in Cardiomyocytes

视网膜母细胞瘤蛋白 (Rb) 相关蛋白 48 和 46 与 p300/GATA4 形成功能复合物并抑制心肌细胞的肥大反应

• 发表时间: 2011
• 作者: Y.Matsubara;M.Okazaki;T.Yamamoto;K.Takita;杉分隆介;岩間世界;R.G.Gonnade;Yuko Mori;Rui Tamura;Rui Tamura;Rajesh G Gonnade;Yoichi sunagawa;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一
• 通讯作者: 砂川陽一

Human SNF5/INI1, a Component of the Human SWI/SNF Chromatin Remodeling Complex, Inhibits Hypertrophic Responses by Suppressing p300/GATA4-dependent Pathways in Cardiomyocytes

人类 SNF5/INI1 是人类 SWI/SNF 染色质重塑复合物的一个组成部分，通过抑制心肌细胞中 p300/GATA4 依赖性途径来抑制肥厚反应

• 发表时间: 2012
• 作者: Y.Matsubara;M.Okazaki;T.Yamamoto;K.Takita;杉分隆介;岩間世界;R.G.Gonnade;Yuko Mori;Rui Tamura;Rui Tamura;Rajesh G Gonnade;Yoichi sunagawa;砂川陽一;砂川陽一
• 通讯作者: 砂川陽一

心筋細胞肥大におけるCdk9キナーゼ活性の役割

Cdk9激酶活性在心肌细胞肥大中的作用

• 发表时间: 2011
• 作者: Y.Matsubara;M.Okazaki;T.Yamamoto;K.Takita;杉分隆介;岩間世界;R.G.Gonnade;Yuko Mori;Rui Tamura;Rui Tamura;Rajesh G Gonnade;Yoichi sunagawa;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一
• 通讯作者: 砂川陽一

A Natural p300-Specific Histone Acetyltransferase Inhibitor, Curcumin, in Addition to Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitor, Exerts Beneficial Effects on Left Ventricular Systolic Function After Myocardial Infarction in Rats

• DOI: 10.1253/circj.cj-10-1072
• 发表时间: 2011-09-01
• 期刊: CIRCULATION JOURNAL
• 影响因子: 3.3
• 作者: Sunagawa, Yoichi;Morimoto, Tatsuya;Hasegawa, Koji
• 通讯作者: Hasegawa, Koji

Nobiletin, a Citrus Flavonoid, Prevents the Worsening of Heart Failure in Rats with Myocardial Infarction

川陈皮素（一种柑橘类黄酮）可预防心肌梗塞大鼠心力衰竭的恶化

• 发表时间: 2010
• 作者: Y.Matsubara;M.Okazaki;T.Yamamoto;K.Takita;杉分隆介;岩間世界;R.G.Gonnade;Yuko Mori;Rui Tamura;Rui Tamura;Rajesh G Gonnade;Yoichi sunagawa;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一;砂川陽一
• 通讯作者: 砂川陽一