創薬標的をめざしたコレステロール生合成の新規調節機構の解明

阐明药物发现靶标的胆固醇生物合成的新调节机制

• 批准号: 10J10030
• 负责人: 横倉 良行
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J10030/
• 关键词: コレステロール; 動脈硬化; DHA; 炎症; メタボローム; 重症喘息; 12/15-LOX

私はスクアレンエポキシダーゼ活性を促進する因子SPF (supernatant protein factor)がコレステロールの生合成をどのような機構で促進するのか分子レベルで詳細に解析すること、およびSPFが高コレステロール薬の新規創薬標的となるかを解明することを目指した。その結果、apoEとSPFのダブルKOマウスではapoEKOマウスに比べ血中コレステロールレベルが約60%へ有意に低下していることが分かった。しかし血中トリグリセリドレベルには影響を与えなかった。また、apoEKOマウスでは動脈壁に脂質の蓄積を伴う典型的な動脈硬化層が認められたのに対して、ダブルKOマウスでは脂質の蓄積が著しく軽減していることを見出した。SPFの研究を進行するとともに、私は、動脈硬化症の予防因子として注目される脂質であるω3系脂肪酸のドコサヘキサエン酸(DHA)にも興味をもち、解析を開始している。私はDHA由来の新規活性脂質を探索するためにLC-MS/MSを用いてDHA代謝物の定量分析系を確立し、マウスのザイモザン腹膜炎において腹腔内に浸潤した細胞から刺激依存的に生成するDHA代謝物のメタボローム解析を行った。その結果、DHAの14位と20位が水酸化された新規代謝物14,20-diHDoHEが既知の抗炎症代謝物であるプロテクチンD1(PD1:10,17-diHDoHE)と同程度生成し、腹膜炎においてPD1に匹敵する好中球浸潤抑制活性を有することを明らかにした。さらに、この新規代謝物が12/15-リポキシゲナーゼ(12/15-LOX)依存的に生成することを見出し、アレルギー性喘息モデルにおいて、12/15-LOXKOマウスでは症状が悪化すること、KOマウスに14,20-diHDoHEを投与することにより野性型と同程度のレベルまで症状が改善することを見出した。

The SPF (Supernatant Protein Factor) is a new gene promoter for the production of protein. About 60% of the results were negative for apoE and SPF. It's not like we're going to be able to do this. The accumulation of lipids in the arterial wall is accompanied by a typical hardening layer. SPF research is underway on the prevention of atherosclerosis and on the analysis of omega-3 fatty acids (DHA). A quantitative analysis system for DHA metabolites was established using LC-MS/MS to explore the origin of DHA and to analyze DHA metabolites in peritoneal infiltration and cellular stimulation-dependent production. As a result, DHA was acidified at position 14 and position 20, and a new metabolite, 14,20-diHDoHE, was produced to the same extent as a known anti-inflammatory metabolite, PD1 (PD1:10,17-diHDoHE), which had inhibitory activity against peritoneal infiltration. In addition, the 12/15-LOXKO metabolite was produced by the 12/15-LOXKO metabolite (12/15-LOX). The 12/15-LOXKO metabolite was produced by the 12/15-LOXKO metabolite (12/15-LOX). The 12/15-LOXKO metabolite was produced by the 14,20-LOXKO metabolite (12/15-LOX).

项目成果

ドコサヘキサエン酸由来の抗炎症性代謝物のメタボローム解析

二十二碳六烯酸抗炎代谢物的代谢组学分析

• 发表时间: 2010
• 作者: Yoichi Kobayashi;Ruriko Ohshima;小林洋一;Yoichi Kobayashi;Gabriel Sagarzazu;Yoichi Kobayashi;Yoichi Kobayashi;森西裕太;小林洋一;松本祐亮;森西裕太;小林洋一;Yoichi Kobayashi;関東詩織;小林洋一;横倉良行;Naoto Tamai;横倉良行;小林洋一;横倉良行
• 通讯作者: 横倉良行

LC-MS/MS-based lipidomics of anti-inflammatory metabolites derived from docosahexaenoic acid

基于 LC-MS/MS 的二十二碳六烯酸抗炎代谢物脂质组学

• 发表时间: 2012
• 作者: Yoichi Kobayashi;Ruriko Ohshima;小林洋一;Yoichi Kobayashi;Gabriel Sagarzazu;Yoichi Kobayashi;Yoichi Kobayashi;森西裕太;小林洋一;松本祐亮;森西裕太;小林洋一;Yoichi Kobayashi;関東詩織;小林洋一;横倉良行
• 通讯作者: 横倉良行

ドコサヘキサエン酸代謝物の包括的メタボローム解析

二十二碳六烯酸代谢物的综合代谢组学分析

• 发表时间: 2011
• 作者: Yoichi Kobayashi;Ruriko Ohshima;小林洋一;Yoichi Kobayashi;Gabriel Sagarzazu;Yoichi Kobayashi;Yoichi Kobayashi;森西裕太;小林洋一;松本祐亮;森西裕太;小林洋一;Yoichi Kobayashi;関東詩織;小林洋一;横倉良行;Naoto Tamai;横倉良行
• 通讯作者: 横倉良行