ミトコンドリアDNA障害による遅延性神経細胞死の発現機能

线粒体DNA损伤导致神经细胞延迟死亡的表达功能

• 批准号: 21658107
• 负责人: 小野 憲一郎
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21658107/
• 关键词: 虚血; 遅延性神経細胞死; ミトコンドリアDNA; 活性酸素; DNAポリメラーゼγ; 修復機構; mtDNA D-loop; 酸化

ラット海馬由来HV16-4細胞を虚血環境下(2%O2、10%CO2、88%N2)で培養すると、mtDNA D-loopに高頻度に変異の発現することが明らかとなった。すなわり、通常培養では84クローン中6クローン(7.1%)に一塩基置換が起こるのに対し、虚血培養では84クローン中41クローン(48.8%)に一塩基置換あるいは一塩基欠失の起こることが明らかとなった。また、mtDNA修復機構の鍵であるDNAポリメラーゼγの酸化度は、通常培養した場合に比較して有意に高く、活性酸素(ROS)トラップ剤であるDMPO添加すると有意に低下した。さらに、DMPO添加虚血条件下におけるmtDNA D-lopの変異は28.5%(24/84クローン)、変異総数は80.730bpで27bp(変異頻度:3.34bp/10,000bp)と、非添加の48.8%(41/84クローン)、変異総数75,348bpで48bp(6.37bp/10,000bp))に比較して有意に低下することが明らかとなった。したがって、HV16-4細胞は虚血条件下でROSによりmtDNA修復機構の鍵となるミトコンドリアDNAポリメラーゼγの酸化が生じており、mtDNA D-loopの変異の原因の一つはmtDNA修復能の低下であると考えられた。

Hippocampi derived from HV16 -4 cells were cultured in a deficient blood environment (2%O2, 10%CO2, 88%N2), and mtDNA D-loop was found to be highly variable. In normal culture, 6 out of 84 cases (7.1%) were replaced by one group, and in blood culture, 41 out of 84 cases (48.8%) were replaced by one group. DNA sequencing and acidification of mtDNA repair mechanisms are intentionally higher than those of DMPO in normal culture. In addition, under the condition of DMPO addition, mtDNA D-lop variation was 28.5%(24/84 bp), total variation was 80.730bp and 27bp (variation frequency:3.34bp/10,000 bp), non-addition was 48.8%(41/84 bp), and total variation was 75, 348bp and 48bp (6.37bp/10,000 bp). Under the condition of deficient blood, ROS and mtDNA repair mechanism in HV16-4 cells are reduced.