成体組織由来極小胚性幹細胞様細胞の探索

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近年マウス胎児血液、マウス成獣骨髄液および血液中より胚性幹細胞(ES細胞)と類似した細胞が存在することが報告され、この細胞は通常の細胞の大きさに比べて非常に小さい(直径約1-7um)形態を呈することから″very small embryonic-like(VSEL)stem cells"あるいは"Dot cells"と呼ばれている。そこで平成21年度より、この細胞が果たし本当に存在するのかどうか、またマウス以外の成体からも分離可能かどうかについてラットを用いて検証を試みたが、昨年度に関しては期待された細胞集団を獲得することはできなかった。そこで本年度は後述する手法に用いる各種関連試薬や関連機材の変更を試みて、再度目的とする細胞集団の獲得を試みた。Wistar系ラットの末梢血と骨髄間質細胞(大腿骨より)を分離した。次にこれらの細胞集団より、Dot cellsの細胞表面に発現する(ないしは発現しないと)されている、Sca-1陽性・lin陰性・CD45陰性・CD29(β1インテグリン)陽性・Eカドヘリン陽性細胞をFACSによってソーティングをかけるべく、前年度とは異なる数種類の抗体を用いて生きた細胞の状態での回収を試みた。少数ながら細胞集団を得ることが出来たものの、培養過程においてsphere形成を認めず増幅させるには至らなかった。しかし昨年Dezawaらによって、Muse細胞(Multilineage-differentiated Stress Enduring Cells)と名付けられた同様の性格を持つ成人由来多能性幹細胞が、SSEA-1陽性を捉えることによって抽出可能であることが発見された。このMuse細胞は、まさに本研究で探索を試みた細胞集団と極めて類似性が強く、同一のものの可能性もあり、現在同様の方法に従って細胞集団を獲得する試みを行っているところである。