Investigation of structure and function of the COPI-System using single, on nanostructures immobilised molecules and fluorescence resonance energy transfer (FRET)

Ziel der interdisziplinären project jektinitiative ist die Aufklärung der Struktur-Funktions-Zusammenhänge einer bio - molecular machine am Beispiel des Transportvesikels COPI。Das COPI-System坚持理想毛皮死geplanten Untersuchungen geeignet,达西奇Das Coatomer毛皮一张spezifische Markierung麻省理工学院捐赠-和Akzeptorfarbstoffen biochemisch塞纳河7 Untereinheiten zerlegen和reversibel wieder祖茂堂einem funktionierenden Coatomer zusammenbauen laßt。Während der prinzipielle Mechanismus der copi -Vesikel- abschnrung in Detail aufgeklärt wurde, ist wenig zur architekturr and Dynamik der strukturr des Coatomers sowie zum Transportweg abgeschn<e:1> rter Vesikel und dessen Steuerung in vivo bekant。Zur Strukturaufklärung soll im beantragten Projekt der fluorescence - resonanz - energy - transfer (FRET) auf einzelmolek<s:1> lebene (single-pair, spFRET) eingesetzt werden。本文介绍了一种新型的3D-Model - model - coomtomer - erstellt - werden复合材料的制备方法。Die Dynamik der intramekularen Abstände und deren Veränderung beanbindung von Rezeptoren soll durch experimentandeinzelnen coatomer - molek<e:1> len， Die aufeiner纳米结构固定元件，mit einer Zeitauflösung imµs-ms Bereich aufgeklärt werden。研究结果表明：zeitaufgelöste荧光成像技术是一种先进的gfp - marketer COPI-Vesikel技术。在学习中学习和理解世界。

Ziel der interdisziplinären Projektinitiative ist die Aufklärung der Struktur-Funktions-Zusammenhänge einer Bio-Molekularen Maschine am Beispiel des Transportvesikels COPI. Das COPI-System ist ideal für die geplanten Untersuchungen geeignet, da sich das Coatomer für eine spezifische Markierung mit Donor- und Akzeptorfarbstoffen biochemisch in seine 7 Untereinheiten zerlegen und reversibel wieder zu einem funktionierenden Coatomer zusammenbauen läßt. Während der prinzipielle Mechanismus der COPI-Vesikel-Abschnürung im Detail aufgeklärt wurde, ist wenig zur Architektur und Dynamik der Struktur des Coatomers sowie zum Transportweg abgeschnürter Vesikel und dessen Steuerung in vivo bekannt. Zur Strukturaufklärung soll im beantragten Projekt der Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer (FRET) auf Einzelmolekülebene (single-pair, spFRET) eingesetzt werden. Hierzu sollen verschiedene Kombinationen von Untereinheiten des Coatomer-Komplexes gezielt mit Farbstoffen markiert und aufgrund der bestimmten Donor/Akzeptor-Abstände ein 3D-Model des Coaotomer erstellt werden. Die Dynamik der intramolekularen Abstände und deren Veränderung bei Anbindung von Rezeptoren soll durch Experimente an einzelnen Coatomer-Molekülen, die auf einer Nanostruktur fixiert sind, mit einer Zeitauflösung im µs-ms Bereich aufgeklärt werden. Es soll die Richtungssteuerung durch das zeitaufgelöste Fluoreszenz-Imaging einzelner farbstoff- oder GFP-markierter COPI-Vesikel bzw. Coatomere in lebenden Zellen studiert und verstanden werden.