Development of fluorometric potassium ion imaging reagent in a cell

细胞内荧光钾离子成像试剂的研制

• 批准号: 22550154
• 负责人: TAKENAKA Shigeori
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kyushu Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22550154/
• 关键词: ナノバイオ; 分子認識; 細胞・組織; 生体分子; 蛍光プローブ; Gリッチオリゴヌクレオチド; 4本鎖DNA; FRET; カリウム; ナトリウム; G-カルテット; オリゴヌクレオチド; カリウムイオン; 蛍光イメージング; 4本鎖; 細胞; ペプチド; 細胞内カリウムイオン; アポトーシス; Kチャネル; G-リッチオリゴヌクレオチド; 核排出シグナルペプチド

In this project, we successful synthesized a fluorometric potassiumdetecting reagent, PSO-5, consisted of thrombin binding aptamer (TBA) carrying FAM at the 5'-end conjugated with a peptide carrying TAMRA and biotin at the middle and at its C-terminus, respectively. K^+ in the cell was visualized based on the FRET ratio of the ternary complex of streptavidin with PSO-5 and biotinylated nuclear export signal peptide. Change of FRET signal of PSO-5 was observed that indicated a decrease in K^+ concentration in the cell upon addition of apoptosis-inducing drug to monitor K^+ efflux from the cell.

在本项目中，我们成功合成了一种荧光钾检测试剂PSO-5，它由5'端带有FAM的凝血酶结合适体（TBA）与中间和C端分别带有TAMRA和生物素的肽缀合而成。基于链霉亲和素与 PSO-5 和生物素化核输出信号肽的三元复合物的 FRET 比率，对细胞中的 K^+ 进行可视化。观察到PSO-5的FRET信号的变化，这表明在添加凋亡诱导药物以监测细胞中的K + 流出后细胞中的K + 浓度降低。

项目成果

Fluorescence imaging of biological potassium using peptide-oligonucloetide conjugate probe

使用肽-寡核苷酸缀合物探针对生物钾进行荧光成像

• 发表时间: 2012
• 作者: Naoto Yamaguchi;Tatsuya Naiki;Takamitsu Kohzuma;Toshikazu Takada;Fumihiko Sakata;Seiji Mori;S.Takenaka(他7名)
• 通讯作者: S.Takenaka(他7名)

Fluorescent imaging of potassium ion in the cell using a thrombin binding aptamer (TBA) conjugated with a peptide carrying fluorescent dyes at its termini

使用末端带有荧光染料的肽缀合的凝血酶结合适体 (TBA) 对细胞中的钾离子进行荧光成像

• 发表时间: 2011
• 作者: S.Takenaka;K.Ohtsuka;T.Matsuda;K.Takemoto;T.Nagai
• 通讯作者: T.Nagai

九州工業大学竹中研究室研究発表

九州工业大学竹中研究室研究发表会

細胞表面カリウムイオンセンシング試薬PSOのコレステロールリンカーの効果

细胞表面钾离子传感试剂PSO中胆固醇连接体的作用

• 发表时间: 2012
• 作者: N.Okamoto;K.Yamaguchi;E.Mizohata;K.Tokuoka;N.Uchiyama;S.Sugiyama;H.Matsumura;K.Inaka;Y.Urade;T.Inoue;吉田勝;S.Takenaka (他7名);竹中繁織(依頼講演);吉田勝;竹中繁織(他5名)
• 通讯作者: 竹中繁織(他5名)

Fluorometric imaging of an intercellular potassium ion using a DNA-peptide conjugate

使用 DNA-肽缀合物对细胞间钾离子进行荧光成像

• 发表时间: 2012
• 作者: S.Ohzawa;K.Sota;T.Hatsuda;T.Nagai;Y.Yoshiura;K.Nakazawa;S.Sato;S.Takenaka
• 通讯作者: S.Takenaka